KMH-2細胞 人甲狀腺癌細胞 含STR
- 公司名稱 上海琛藝實業(yè)有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號 KMH-2細胞
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時間 2023/5/10 15:51:27
- 訪問次數(shù) 1102
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | T25 10的六次方 |
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貨號 | KMH-2細胞 | 應用領域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),石油 |
主要用途 | 醫(yī)院及其研究所科研實驗 |
人甲狀腺癌細胞 含STR
- 組成:
組份 | 數(shù)目 |
細胞 | 1 T-25瓶 |
細胞說明書 | 一份 |
- 細胞簡介:
生長特性: | 貼壁生長
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細胞來源: | 從ATCC/中科院/協(xié)和醫(yī)院等地引進 |
培養(yǎng)條件: | 培養(yǎng)基:90%1640培養(yǎng)基 +10%FBS(推薦BI -04-001-1ACS*胎牛血清) 氣相:空氣95%,二氧化碳5% 溫度:37℃ |
培養(yǎng): |
1.用75%酒精噴灑整個瓶消毒,將其平躺置于培養(yǎng)箱中進行2-3小時的緩沖,.然后置于無菌操作臺,打開瓶口,將其中的培養(yǎng)液去掉,再往其中加入5-6mL新鮮培養(yǎng)基并置于細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng),根據(jù)細胞生長狀況及培養(yǎng)基顏色變化對其進行換液以及傳代; 2.待細胞長滿瓶底面積80%-90%,需要對其進行傳代,第yi次傳代比例為1:2。 3傳代步驟:將0.25%含EDTA胰酶置于37°預熱,倒掉培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,往培養(yǎng)瓶中加入1mlPBS,輕晃洗滌后棄去。往瓶中加1ml預熱好的胰酶,置于37°孵育消化(第yi次消化需時常取出置于顯微鏡下觀察,以顯微鏡下細胞觸角回收變圓、輕拍瓶壁見細胞脫落為*消化時間,記錄*消化時間,以便于下次消化),消化好后加入1ml*培養(yǎng)基終止消化。用移液槍輕輕吹打瓶壁上的細胞,使之*脫落,然后收集細胞懸液,1200rpm離心3min,棄上清,加入*培養(yǎng)基重懸細胞,進行傳代。
二、懸浮細胞 1.用75%酒精噴灑整個瓶消毒,然后置于無菌操作臺,打開瓶口,輕輕吹打后,將其中的細胞懸液轉(zhuǎn)移到離心管中,然后1200rpm離心3min,去上清; 2.將離心好的細胞轉(zhuǎn)移至T-25瓶中,并加入5-6mL新鮮培養(yǎng)基,然后將其置于細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng),根據(jù)細胞生長狀況及培養(yǎng)基顏色變化對其進行換液(離心后去舊液,加入新鮮培養(yǎng)基); 3.顯微鏡觀察細胞數(shù)目比較多時,對其進行傳代,第yi次傳代比例為1:2(離心后平均分成兩瓶培養(yǎng))。
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細胞總數(shù): | 1~3*106 |
傳代周期: | 2-3天 |
傳代比例: | 1:2~1:4 |
換液頻率: | 2-3天 |
凍存液: | 90%FBS+10%DMSO |
四、注意事項:
1 收到細胞后首先觀察T-25瓶是否有損壞、漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。
2 瓶中運輸?shù)呐囵B(yǎng)液不能重復使用,請換新鮮培養(yǎng)液培養(yǎng)
3 對于貼壁細胞,若大部分細胞漂浮,置于培養(yǎng)箱隔夜觀察,大部分漂浮細胞重新貼壁,表明細胞活力正常,繼續(xù)培養(yǎng),剩余漂浮的細胞可以去掉;若大部分細胞仍然不貼壁,將漂浮的細胞離心收集,用臺盼藍染色鑒定細胞活力,并與本公司銷售人員及時聯(lián)系。
4 建議客戶收到細胞后不同倍鏡各拍幾張細胞的照片,記錄細胞狀態(tài),如細胞狀態(tài)出現(xiàn)問題請于72h內(nèi)與本公司銷售聯(lián)系,以便于更好的幫您解決問題,超過時間我段,本公司則默認細胞狀態(tài)良好,不免費對后續(xù)細胞狀態(tài)問題進行售后。
人甲狀腺癌細胞 含STR-如何培養(yǎng)該細胞?
細胞培養(yǎng)是當前細胞生物學乃至整個生命科學研究與生物工程中基本的實驗技術(shù)。
細胞培養(yǎng)為疫苗生產(chǎn)、藥物研制與腫瘤防治等醫(yī)學實踐提供了全新的手段。細胞培養(yǎng)包括原核生物細胞,入細菌;真核單細胞生物,入酵母菌、四膜蟲等;植物細胞與細胞的培養(yǎng)以及于此密切相關(guān)的病毒的培養(yǎng)。
細胞培養(yǎng)
體外培養(yǎng)的細胞可分為原代細胞(primary culture cell)與傳代細胞(subculture cell)。原代細胞是指機體取出后立即培養(yǎng)的細胞。有人把培養(yǎng)的第1代細胞與傳10代以內(nèi)的細胞統(tǒng)稱為原代細胞培養(yǎng),適應在體外培養(yǎng)下條件下持續(xù)傳代培養(yǎng)的細胞稱為傳代細胞。
分散的細胞懸液在培養(yǎng)瓶中很快(在幾十分鐘至數(shù)小時內(nèi))就貼附在瓶壁上,這就稱為細胞貼壁。
分散呈圓球形的細胞一經(jīng)貼壁就迅速鋪展并開始有絲分裂,逐漸形成致密的細胞單層,稱為單層細胞(sigle layer cell),這種培養(yǎng)方法稱為單層細胞培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細胞|細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
如果漂浮的死細胞多,說明細胞有很多老化的,建議每次傳代的時候,在用胰酶消化之前,用PBS將細胞漂洗一遍,胰酶消化的時間要把握好,37℃2-3min即可,及時終止反應,否則胰酶消化過度對細胞損傷較大,也會有很多死細胞出現(xiàn)的;吹打細胞的動作要輕柔。
體外培養(yǎng)的細胞,不論是元代細胞還是傳代細胞一般不包吃體內(nèi)原有的細胞形態(tài)。但大體可以分為兩種基本形態(tài):成纖維樣細胞(fibroblast like cell)與上皮樣細胞(epitbelial like cell)。此外還有一些可移動的游走細胞。
做細胞實驗的同學看過來。
選擇上海琛藝生物細胞有3個理由:
1、細胞狀態(tài)好,形態(tài)佳,易成活,是市面上比較好養(yǎng)的細胞之一;
2、物流迅速,復蘇好后發(fā)貨,次日就能到;
3、使用我司推薦的進口品牌血清進行培養(yǎng)實驗,效果更佳