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上海起發實驗試劑有限公司
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abeomics 14-131ACL說明書
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TLR9/NF-kB Leeporter™ Luciferase Reporter-HEK293 Cell Line
TLR9/NF-kB Leeporter™ 螢光素酶報告基因-HEK293 細胞系
產品編號：14-131ACL
| 應用 ： | 功能分析 |
| 數量 ： | 1 瓶 |
| 內容 ： | 每個小瓶在 1 ml 90% FBS + 10% DMSO 中含有 2 ~ 3 x 10^6 個細胞。 |
| 儲存情況 ： | 收到后立即儲存在液氮中。 |
TLR9/NF-kB Leeporter™ 螢光素酶報告細胞系是穩定轉染的 HEK 293 細胞系，在 NF-kB 反應元件的轉錄控制下表達全長人類 Toll 樣受體 9 (TLR9) 和海腎螢光素酶報告基因. TLR9 是關鍵的先天免疫受體之一。細胞系的功能活性已通過 TLR9 配體測定得到驗證，其中在被 CpG 激活后，TLR9 迅速啟動下游信號通路并介導 NF-kB 的核轉位（圖 1）。
應用：
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監測 TLR9 信號通路活性。
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篩選 TLR9 信號通路的激活劑或抑制劑。
培養條件：
細胞應在 37 o C 和 5% CO 2 使用 DMEM 培養基（含 L-谷氨酰胺、4.5g/L 葡萄糖和丙酮酸鈉）并添加 10% 熱滅活 FBS 和 1% Pen/Strep 以及 2 µ g/ml 嘌呤霉素和 5 µg /ml 殺稻瘟菌素 （注意：在報告細胞分析期間可以省略嘌呤霉素和殺稻瘟素）。
建議在收到冷凍細胞后或在 37 o C 水浴 中從液氮中快速解凍，轉移到含有 10 ml 不含嘌呤霉素和殺稻瘟菌素的生長培養基的試管中，離心細胞，重懸細胞在預熱的生長中不含嘌呤霉素和殺稻瘟菌素的培養基，將重懸的細胞轉移到 T25 瓶中，在 37 o C-CO 2 培養箱中培養。
將 T25 燒瓶放在培養箱中 1~3 天，不要干擾或更換培養基，直到細胞*恢復活力并貼壁。一旦細胞貼壁率超過 90%，去除生長培養基并通過胰蛋白酶消化和離心使細胞傳代。在第一次傳代時，切換到含有嘌呤霉素和殺稻瘟菌素的生長培養基。細胞在達到*匯合之前應該被分裂。
為了使細胞傳代，用胰蛋白酶/EDTA 將細胞從培養容器中分離出來，加入完整的生長培養基并轉移到試管中，旋轉細胞，重懸細胞并將適當等分的細胞懸浮液接種到新的培養容器中。傳代比例 = 每周 1:10 至 1:20。 為了獲得滿意的結果，細胞不應傳代超過 16 次。
