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上海起發(fā)實(shí)驗(yàn)試劑有限公司
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問題一：
在過氧化物標(biāo)記的雙夾心elisa實(shí)驗(yàn)中得到的背景值較高，原因是什么？LowCross-Buffer®能起到什么作用嗎？
答復(fù)：
了解二抗能否與其他哺乳動(dòng)物的抗體結(jié)合是非常重要的。除非是高度純化的抗體，抗兔lgG的二抗也能夠與鼠lgG，山羊lgG結(jié)合，原因是哺乳動(dòng)物抗體的高 度同源性，不經(jīng)過純化（預(yù)吸附）的二抗可以與其他抗體進(jìn)行高親和性的交叉反應(yīng)，這種情況下，LowCross-Buffer起不到作用，二抗必須不能與捕 獲抗體結(jié)合，例如，Biotrend可以提供各類避免此類交叉反應(yīng)的預(yù)吸附抗體。
問題二：
我需要對(duì)LowCross-Buffer®進(jìn)行稀釋嗎？
答復(fù)：
是即用型的。樣品或檢測(cè)抗體直接用此稀釋，僅僅在競(jìng)爭(zhēng)性實(shí)驗(yàn)或一些免疫組化實(shí)驗(yàn)中，可以用水或一些生理緩沖液對(duì)其進(jìn)行稀釋。在這種情況下，實(shí)驗(yàn)者要通過測(cè)試找到合適的比例。
問題三：
LowCross-Buffer®會(huì)對(duì)酶標(biāo)檢測(cè)的顯色反應(yīng)產(chǎn)生影響嗎？
答復(fù)：
LowCross-Buffer®不會(huì)使堿性磷酸酶或過氧化物酶活性減弱。
有的用戶把酶標(biāo)檢測(cè)抗體在LowCross-Buffer®孵育后會(huì)檢測(cè)到酶活性的增強(qiáng)。
問題四：
LowCross Buffer®能用在熒光物質(zhì)結(jié)合物中嗎？比如在蛋白芯片實(shí)驗(yàn)中。
答復(fù)：
是的，可以用在蛋白芯片中。對(duì)于青染料（如Cy5, Cy3，），有的實(shí)驗(yàn)中可觀察到熒光量的增強(qiáng)。
問題五：
可以用于抗體或多克隆抗體嗎
答復(fù)：
可以，不過在使用多抗時(shí)，要注意到多抗中含有親和力不同的多種抗體，LowCross-Buffer®僅允許高親和性的抗體結(jié)合而消除低親和性的結(jié)合。使 用LowCross-Buffer®時(shí)可適當(dāng)增加多抗的濃度，因?yàn)榭贵w濃度的增加也是高親和性抗體濃度的增加，同時(shí)LowCross-Buffer®抑制 低親和性結(jié)合。但是不是要加大抗體的濃度還要取決于抗體的純度。
問題六：
LowCross-Buffer®可以反復(fù)凍融嗎？
答復(fù)：
反復(fù)凍融幾次不會(huì)有影響，但是在使用前要充分混勻。
問題七：
為什么LowCross-Buffer®能減少交叉反應(yīng)？
答復(fù)：
我們所說的基質(zhì)效應(yīng)一般是一些基質(zhì)成分（如人血清標(biāo)本中的血清蛋白）的與分析物或抗體的低親和性結(jié)合。分析物會(huì)被標(biāo)本中的蛋白或其他成分掩蔽掉而不能與抗體結(jié)合，抗體也可以被基質(zhì)掩蔽。LowCross-Buffer®可以減少基質(zhì)對(duì)抗體的掩蔽。
問題八：
LowCross-Buffer®可以用在哪些方面？
答復(fù)：LowCross-Buffer®是一種新的用于免疫實(shí)驗(yàn)（如ELISA、WB、蛋白芯片和免疫-PCR）的樣本緩沖液，有助于減少干擾作用，如非特異性結(jié)合，交叉反應(yīng)和基質(zhì)效應(yīng)，抗原抗體的高親和結(jié)合不會(huì)被減弱。
問題九
LowCross-Buffer®能替代表面封閉液?jiǎn)幔?/p>
答復(fù):
不行，LowCross-Buffer®不是表面封閉液，你可以用它稀釋樣本和抗體，我們推薦使用CANDOR的封閉液，能起到很好的封閉作用。
