化工儀器網(wǎng)技術(shù)文章
全面解讀：抗體選擇指南，值得珍藏
閱讀：1110 發(fā)布時間：2024-8-19避免同種系物種的一抗選擇
- 避免同種系干擾：在進行小鼠樣本檢測時，應避免使用小鼠或大鼠來源的一抗。
- 原因：防止二抗與樣本中的內(nèi)源性免疫球蛋白發(fā)生交叉反應，導致背景信號過高。
稀有樣本種屬的抗體選擇策略
- 免疫原序列查詢：對于市面上難以找到驗證過的抗體，如豬、牛等，可以通過查詢抗體的免疫原序列，并與待測蛋白進行同源性分析。
- 同源性標準：若同源性超過90%，可以嘗試使用，但需注意，這種情況下，廠家通常不提供質(zhì)保。
- 同源性分析方法：詳見下方視頻教程。
- 商業(yè)機密問題：對于某些品牌，如CST，免疫原序列可能屬于商業(yè)機密。此時，可以提供自己的蛋白序列，請求廠家專家?guī)椭治鐾葱圆⒔o出使用建議。
實驗方法確認
確認抗體適用性
- 實驗方法標注：檢查抗體說明書上的實驗方法（application），確保包含您計劃進行的實驗類型。
- WB實驗簡便性：如果僅進行Western Blot（WB），選擇在說明書中標注WB的抗體即可。
- 多實驗方法選擇：建議選擇實驗方法多樣的抗體，以便未來進行其他類型實驗時無需重復購買。
- 免疫組化（IHC）注意事項：若進行IHC，需確認樣本類型（如石蠟切片、冰凍切片或細胞）是否已由廠家驗證。未經(jīng)驗證的樣本類型通常不提供質(zhì)保。