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青島捷世康生物科技有限公司
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果膠酶(PG)檢測試劑盒(DNS比色法)產品介紹

時間:2025/3/20閱讀:395
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產品簡介:

天然果膠類物質以原果膠、果膠(Pectin)、果膠酸的形態廣泛存在于植物的果實、根、莖、葉中,是細胞壁的一種組成成分,它們伴隨纖維素而存在,構成相鄰細胞中間層粘結物,使植物組織細胞緊緊黏結在一起。果膠酶(Pectinase)是一類分解果膠質酶類的總稱,實質是多聚半乳糖醛酸水解酶,包括原果膠酶,果膠酯酶,多聚半乳糖醛酸酶和果膠裂解酶四大類,廣泛存在于植物果實和微生物中,主要用于食品、釀酒、環保、醫藥、紡織及日化用品行業。

果膠酶(PG)檢測試劑盒(DNS 比色法)檢測原理是果膠酶水解果膠生成β-半乳糖醛酸,與二硝基水楊酸(DNS)反應形成有色化合物,該化合物呈色強度與半乳糖醛酸濃度成正比,于分光光度計 540nm 處測定吸光度,通過與標準曲線比較計算出樣品中果膠酶活性,主要用于定量檢測植物組織或果實中果膠酶,反應顏色越深,吸光度越大,果膠酶的活性越強。該試盒僅用于科研領域,不適用于臨床診斷或其他用途。

自備材料:

1、蒸餾水    

2、實驗材料:桃子、李子、蘋果、杏等果實或其他植物組織

3、電子天平、水果刀或剪刀、研缽或勻漿器、離心管或試管、離心機、水浴鍋

4、比色杯、分光光度計

操作步驟(僅供參考)

1、果膠酶提取:取果實或其他植物組織,洗凈,擦干,稱取剪碎的新鮮樣品 3g,置于提前 4℃預冷的研缽或勻漿器,加入 3ml 4℃預冷的 Pectinase Lysis Buffer,充分研磨或勻漿后轉入離心管或試管,410000g 離心 10min,留取上清液,即為果膠酶提取液,4℃保存待用。

2、稀釋半乳糖醛酸標準液:取適量的半乳糖醛酸標準(1mg/ml),按下表進行稀釋:


加入物(單位:μl)

1

2

3

4

5

半乳糖醛酸標準(1mg/ml)

20

40

60

80

100

Pectinase Lysis Buffer

80

60

40

20

0

半乳糖醛酸濃度(μg/ml)

200

400

600

800

1000


 3、加樣:按照下表設置空白管、標準管、對照管、測定管,溶液應按照順序依次加入,并注意避免產生氣泡,小心混勻。如果樣品中的果膠酶活性過高,可以減少樣品用量或適    當稀釋后再進行測定,樣品的檢測最好能設置 2 平行管,求平均值。


加入物(單位:ml)

空白管

標準管

對照管

測定管

Pectinase Lysis Buffer

0.3

半乳糖醛酸標準(1~5 號管)

0.3

果膠酶提取液

0.2(提前煮沸 5min)

0.2

Pectinase Assay Buffer

0.1

0.1


37℃水浴 1h。

DNS 顯色液

0.3

0.3

0.3

0.3


 4、測定:沸水浴 5min,自來水中將離心管或試管冷卻至室溫,以蒸餾水稀釋至 2.4ml, 混勻,比色杯光徑 1cm,以空白管調零,以分光光度計立即系列標準管、對照管、測定管在 540nm 處吸光度。

注意事項:

1、 取樣量、試劑用量應根據果膠含量適當調整。

2、 可溶性糖對測定結果有較大影響,應去除樣品中的可溶性糖。

3、 Pectinase Lysis Buffer 應密閉保存,避免有效成分揮發。

4、 37℃水浴 1h 后,應立即加入 DNS 顯色液。

5、 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

 

有效期:6 個月有效;低溫運輸,按要求保存。

 




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