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DNA提取的類型與基本原則
DNA提取的類型與基本原則
核酸提取通常是開啟生物學研究的第一步，而且提取的核酸質量高低也是決定下游實驗成敗的關鍵因素之一，那么你知道DNA提取的類型與基本原則是什么嗎？讓我們一起來看看吧！
一、核酸提取類型：
1.總RNA提取
總RNA中，75-85%為rRNA（主要是28S-26S/23S和18S/16S rRNA），其余的由分子量大小和核苷酸序列各不相同的mRNA和小分子RNA如tRNA、5S rRNA、5.8S rRNA、miRNA、siRNA、小核RNA及核仁小分子RNA等組成。
2.miRNA提取
MicroRNAs（miRNAs）是小型的、高度保守的RNA分子，如小干擾RNAs（siRNAs），通過與他們的堿基配對調節其同源mRNA的分子表達，以預防通過各種機制的表達。他們已成為進行發育、細胞增殖、分化和細胞周期的重點監管機構。
3.基因組DNA提取
進行基因結構和功能研究以及基因診斷，通常要求得到的片段長度不小于100～200kb。在DNA提取過程中應盡量避免使DNA斷裂和降解的各種因素，以保證DNA的完整性，為后續的實驗打下基礎。
4.質粒抽提
質粒抽提方法即去除RNA，將質粒與細菌基因組DNA分開，去除蛋白質及其它雜質，以得到相對純凈的質粒。
二、DNA提取的基本原則
1.保證DNA結構的完整性
不同的下游實驗對于DNA結構的完整性有所區別。如PCR、Southern雜交這一類實驗基本保證所需片段的完整，而二代測序實驗為了獲得全面的序列信息對DNA的完整性要求更高。
2.保證DNA的純度
去除對下游實驗中酶分子有抑制作用的有機溶劑和高濃度金屬離子，將蛋白質、多糖、多酚等生物大分子的污染降到低，去除其他核酸。
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