【參數信息】
英文名稱:DRAQ5
中文名稱:DRAQ5遠紅外DNA染料
CAS NO:254098-36-7
分子式:C22H28N4O4
分子量:412.54
狀態:紅色液體
Ex/Em:647/680 nm
純度:≥95%
儲存條件:-20℃避光干燥
生產廠商:西安強化生物科技
【簡單概述】
DRAQ5遠紅外DNA染料,能聯合其它常見的標記染料比如:GFP或FITC,用于固定或非固定/活細胞的染色。與任何其它細胞通透性
的DNA嵌入染料一樣,DRAQ5在長期實驗中可能抑制細胞分裂,需測定染料可能的任何效應。DRAQ5能用于流式細胞儀、活細胞成像
和基于細胞的各種實驗,DRAQ5高度兼容于許多儀器平臺上的標準實驗方案。
DRAQ5染色包含這些優勢:
1)以便捷的即用型水溶性溶液形式提供;
2)能被活細胞快速攝取,提供高水平的細胞核辨別力;
3)無光漂白效應;
4)適用于絕大多數細胞,真核和原核來源:哺乳動物、細菌、寄生
蟲、植物等;
5)流式細胞檢測中與常見的FITC/GFP+PE結合實驗無需做熒光補償;
6)不需要RNase處理;
7)與DNA結合后沒有熒光增強,因此,測量的熒光與細胞內的核DNA量呈比例和化學
計量比。測量不到mtDNA結合,與RNA結合可忽略。
8)兼容于臺式流式細胞儀、激光掃描細胞儀和非紫外激光掃描和基于燈泡的共聚焦顯微
鏡。
【實驗步驟】
注意:由于不需要洗滌的步驟,因此 DRAQ5 的染色通常在其它染色實驗完成后進行。
另外,在檢測培養基中加入 DRAQ5,即可用于活細胞的檢測。
1. 制備磷酸鹽緩沖液,或為特定細胞準備的特殊培養基。
2. 對于懸浮細胞,用 PBS 或培養基重懸細胞,注意細胞密度不超過 4×10^5cells/ml。
注意:對于貼壁細胞,根據細胞融合度估算細胞密度;對于組織切片,根據切片尺寸估計細胞數。
3. 用 PBS(或培養基)按 1:1000 的比例稀釋 DRAQ5,直接滴加到組織切片或細胞中。
4. 輕輕混勻使染液分布均勻,室溫避光孵育 5-30 分鐘(具體時間根據不同的細胞類型進調整)。如需在 37℃環境孵育,需將
孵育時間縮短至 1-3 分鐘,因為在 37 攝氏度時DRAQ5 染色的進度會明顯加快。
注意:因熒光容易淬滅,需要在避光環境中孵育。
5. 無需洗滌或進一步處理即可直接觀察。
【相關試劑】
Indo-1,AM,Cell Permeant
PropidiumMonoazide
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Alexa Fluor 405-Streptavidin
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Alexa Fluor 405-Streptavidin
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本試劑僅適用于科研實驗,敬請知悉。
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