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分子篩(凝膠過濾層析)蛋白純化系統的應用領域

2021-4-29 閱讀(7495)

那么下面上海嘉鵬科技有限公司為大家簡單介紹一下關于分子篩(凝膠過濾層析)蛋白純化系統的應用領域:

分子篩(凝膠過濾層析)蛋白純化系統的應用領域

分子篩層析也并非一無是處,其應用領域主要包括以下方面:

1)脫鹽:

高分子(如蛋白質、核酸、多糖等)溶液中的低分子量雜質,可以用分子篩層析除去,這一操作稱為脫鹽。本法脫鹽操作簡便、快速,蛋白質和酶類等在脫鹽過程中不易失活,樣品體積可達柱床體積的25%-30%,為了防止蛋白質脫鹽后溶解度降低會形成沉淀吸附于柱上,一般用醋酸銨等揮發性鹽類緩沖液使層析柱平衡,然后加入樣品,再用同樣緩沖液洗脫,收集的洗脫液用冷凍干燥法除去揮發性鹽類。

2)分離提純:

分子篩層析已廣泛用于酶、蛋白質、氨基酸、多糖、生物堿等物質的分離提純。

3)測定高分子物質的分子量:

用一系列已知分子量的標準品放入同一凝膠柱內,在同一條件下層析,記錄每一分鐘成分的洗脫體積,并以洗脫體積對分子量的對數作圖,在一定分子量范圍內可得一直線,即分子量的標準曲線。測定未知物質的分子量時,可將此樣品加在測定了標準曲線的凝膠柱內洗脫后,根據物質的洗脫體積,在標準曲線上查出它的分子量。

4)高分子溶液的濃縮:

通常將Sephadex G-2550干膠投入到稀的高分子溶液中,這時水分和低分子量的物質就會進入凝膠粒子內部的孔隙中,而高分子物質則排阻在凝膠顆粒之外,再經離心或過濾,將溶脹的凝膠分離出去,就得到了濃縮的高分子溶液。

以上就是上海嘉鵬科技有限公司為大家整理總結關于分子篩(凝膠過濾層析)蛋白純化系統的應用領域。

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