E-EL-R3034 大鼠胰島素(INS)酶聯免疫吸附測定試劑盒
| 參考價 | ￥ 2400 |
| 訂貨量 | ≥1盒 |
- 公司名稱 武漢伊萊瑞特生物科技股份有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號 E-EL-R3034
- 產地 湖北武漢
- 廠商性質 生產廠家
- 更新時間 2022/5/27 9:52:11
- 訪問次數 396
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| 供貨周期 | 現貨 | 規(guī)格 | 96T |
|---|---|---|---|
| 貨號 | E-EL-R3034 | 應用領域 | 生物產業(yè) |
| 主要用途 | 科研 |
用途
該試劑盒用于體外定量檢測Rat 血清，血漿中天然及部分重組INS濃度
檢測原理
本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法。用抗大鼠INS抗體包被于酶標板上，實驗時樣品或標準品中的大鼠INS會與包被抗體結合，游離的成分被洗去。依次加入生物素化的抗大鼠INS抗體和辣根過氧化物酶標記的親和素。抗大鼠INS抗體與結合在包被抗體上的大鼠INS結合、生物素與親和素特異性結合而形成免疫復合物，游離的成分被洗去。加入顯色底物(TMB)，TMB在辣根過氧化物酶的催化下呈現藍色，加終止液后變成黃色。用酶標儀在450nm波長處測OD值，INS濃度與OD450值之間呈正比，通過繪制標準曲線計算出樣品中INS的濃度。
| 反應類型 | 夾心法 |
| 規(guī)格 | 96T |
| 反應時間 | 3.5h |
| 反應性 | Rat |
| 檢測方法 | Colormetric |
| 檢測范圍 | 6.25—400 pg/mL |
| 靈敏度 | 3.75 pg/mL |
| 樣本體積 | 100μL |
| 樣本類型 | 血清，血漿 |
特異性
可檢測樣本中的大鼠INS，且與其它相關蛋白無明顯交叉反應。
重復性
板內，板間變異系數均<10%。
典型數據
由于實驗操作條件的不同（如操作者、移液技術、洗板技術和穩(wěn)定條件等），標準曲線的OD值會有所差異。以下數據和曲線僅供參考，實驗者需根據自己的實驗建立標準曲線。
| (pg/mL) | O.D | Average | Corrected |
|---|---|---|---|
| 400 | 2.415 2.497 | 2.456 | 2.397 |
| 200 | 1.649 1.651 | 1.65 | 1.591 |
| 100 | 0.969 0.973 | 0.971 | 0.912 |
| 50 | 0.482 0.467 | 0.475 | 0.416 |
| 25 | 0.262 0.278 | 0.27 | 0.211 |
| 12.5 | 0.18 0.183 | 0.182 | 0.123 |
| 6.25 | 0.117 0.115 | 0.116 | 0.057 |
| 0 | 0.058 0.06 | 0.059 | -- |
 |
精密度
板內精密度:低濃度樣本,中濃度樣本和高濃度樣本分別在1塊板子上檢測20次。
板間精密度:低濃度樣本,中濃度樣本和高濃度樣本分別在3塊板子上檢測20次。
| Intra-assay Precision | Inter-assay Precision | |||||
|---|---|---|---|---|---|---|
| Sample | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
| n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
| Mean (pg/mL) | 19.26 | 40.93 | 195.61 | 17.58 | 47.64 | 176.39 |
| Standard deviation | 0.98 | 1.86 | 8.22 | 1.05 | 2.19 | 7.37 |
| C V (%) | 5.09 | 4.54 | 4.20 | 5.97 | 4.60 | 4.18 |
回收率
分別往5個不同樣本中添加已知濃度的目標蛋白，做回收實驗，得出回收率范圍和平均回收率。
| Sample Type | Range (%) | Average Recovery (%) |
|---|---|---|
| Serum (n=8) | 86-99 | 94 |
| EDTA plasma (n=8) | 83-97 | 90 |
線性
分別往5個樣本中添加已知濃度的目標蛋白，做回收實驗，得出回收率范圍及平均回收率。將5個樣本分別稀釋2倍，4倍，8倍，16倍做回收實驗，得出回收率范圍及平均回收率。
| Serum (n=5) | EDTA plasma (n=5) | ||
|---|---|---|---|
| 1:2 | Range (%) | 94-102 | 84-97 |
| Average (%) | 98 | 92 | |
| 1:4 | Range (%) | 88-99 | 95-105 |
| Average (%) | 91 | 101 | |
| 1:8 | Range (%) | 98-104 | 92-100 |
| Average (%) | 101 | 96 | |
| 1:16 | Range (%) | 96-107 | 99-110 |
| Average (%) | 99 | 103 |
試劑盒組成及保存
未拆封的試劑盒可在2-8℃保存一周；如果一周以后才使用試劑盒，請拆開試劑盒按照下表中的條件分別保存各組分。
| 中文名稱 | 英文名稱 | 規(guī)格 | 保存條件 |
|---|---|---|---|
| ELISA酶標板(可拆卸) | Micro ELISA Plate(Dismountable) | 8 孔×12 條 | -20℃，可存放6個月 |
| 凍干標準品 | Reference Standard | 2 支 | |
| 濃縮生物素化抗體(100×) | Concentrated Biotinylated Detection Ab | 1支 120 μL | |
| 濃縮HRP酶結合物(100×) | Concentrated HRP Conjugate | 1支 120 μL | -20℃(避光)，可存放6個月 |
| 標準品&樣品稀釋液 | Reference Standard & Sample Diluent | 1瓶 20 mL | 2-8℃.可存放6個月 |
| 生物素化抗體稀釋液 | Biotinylated Detection Ab Diluent | 1瓶 14 mL | |
| 酶結合物稀釋液 | HRP Conjugate Diluent | 1瓶 14 mL | |
| 濃縮洗滌液(25×) | Concentrated Wash Buffer (25×) | 1瓶 30 mL | |
| 底物溶液(TMB) | Substrate Reagent | 1瓶 10 mL | 2-8℃(避光) |
| 反應終止液 | Stop Solution | 1瓶 10 mL | 2-8℃ |
| 封板覆膜 | Plate Sealer | 5 張 | |
| 產品說明書 | Product Description | 1 份 | |
| 質檢報告 | Certificate of Analysis | 1 份 |
說明：所有試劑瓶蓋須旋緊以防止蒸發(fā)和微生物的污染。
試劑體積以實際發(fā)貨版說明書為準。相關試劑在分裝時會比標簽上標明的體積稍多一些，請在使用時量取而非直接倒出。
試驗所需自備物品
1. 酶標儀(450nm波長濾光片)
2. 高精度移液器，EP管及一次性吸頭：0.5-10 μL, 2-20 μL, 20-200 μL, 200-1000 μL
3. 37℃恒溫箱，雙蒸水或去離子水
4. 吸水紙
操作步驟
 | 1. 對應板孔中加入100μL標準品工作液或樣本，37℃孵育90分鐘 |
 | 2. 棄掉板內液體后，立即加入100μL生物素化抗體工作液，37℃孵育60分鐘 |
 | 3. 棄掉板內液體，洗板3次 |
 | 4. 每孔加入100μL HRP酶結合物工作液，37℃孵育30分鐘，棄掉板內液體，洗板5次 |
 | 5. 每孔加入90μL底物溶液，37℃孵育15分鐘左右 |
 | 6. 每孔加入50μL終止液 |
 | 7. 立即在450nm波長下讀數，處理數據 |
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