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葡聚糖凝膠 G-75 G型葡聚糖凝膠

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葡聚糖凝膠 G-75 G型葡聚糖凝膠


Sephadex G-75葡聚糖凝膠 G-75 分離范圍 3000-80000 適用于蛋白分離純化、分子量測定、平衡常數(shù)測定


葡聚糖凝膠是一種珠狀的交聯(lián)葡聚糖,含有大量的羥基,很容易在水中和電解質(zhì)溶液中溶脹。

Sephadex G-75葡聚糖凝膠 G-75 分離范圍 3000-80000 適用于蛋白分離純化、分子量測定、平衡常數(shù)測定

葡聚糖凝膠 G-75 G型葡聚糖凝膠使用的方法:

1. 乙醇浸泡:

在室溫下,將干粉浸泡于50-60%乙醇中至少24小時,并不斷攪拌以保證凝膠溶脹,用無鹽水洗去殘存的乙醇濾干;

2.無鹽水浸泡:

室溫下,在無鹽水中充分溶脹24小時,間隙攪拌,以保證凝膠的*溶脹,然后;

3. 鹽酸浸泡:

在常溫下再用0.2N HCl浸泡12小時,間隙攪拌,濾干,水洗至中性;

4. 將溶脹好的凝膠脫氣后(真空抽濾或超聲波)根據(jù)裝柱要求一次性置入柱內(nèi),注意保持濕態(tài)裝柱,并避免柱內(nèi)產(chǎn)生氣泡或斷層;

5. 上樣前平衡層析柱至少3-5 個柱體積直到記錄儀基線變得平穩(wěn)為止(流出液的PH值等于上柱的Buffer 的PH值);

6. 凝膠過濾的上樣量一般為5%的柱床體積,我們建議初次上樣控制在1-2%的床體積,視分離情況可以調(diào)整;脫鹽時上樣量可以達到20% 的柱床體積,柱高的選擇也與分離要求相關(guān),柱高控制在40-50cm 以下,過高的凝膠層會引起較大的反壓,應(yīng)當(dāng)盡可能避免。難分離物質(zhì)要有一定柱高和流速控制,脫鹽時高徑比為5:1 即可;

7. 洗脫方法:

可以用無鹽水,也可以采用上柱時的緩沖液洗脫;在上柱Buffer 中加入NaCl等梯度洗脫或鹽梯度洗脫也可以*分離純化;

8. 在位清洗(CIP)

凝膠使用十次后作一次CIP,目的是去除柱床內(nèi)沉淀的及頑固殘留的蛋白。方法是以40cm/h 用1M 氫氧化鈉反向洗四個柱體積,再以至少三個柱體積平衡緩沖液再生。

產(chǎn)品名稱:                                               英文名稱:
葡聚糖凝膠 LH-20                                    Sephadax LH-20 
葡聚糖凝膠 G-10                                      Sephadex G-10

葡聚糖凝膠 G-25                                      Sephadex G-25
葡聚糖凝膠 G-50                                      Sephadex G-50
葡聚糖凝膠 G-75                                      Sephadex G-75
葡聚糖凝膠 G-100                                    Sephadex G-100





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