中文名稱 | 熒光染料 DiO高氯酸鹽 | ||
英文名稱 | DiO perchlorate [3,3’-Dioctadecyloxacarbocyanine perchlorate] | ||
Cat # | 22066-100 mg | CAS# | 34215-57-1 |
規格 | 100 mg | 價格 | ¥1,195.00 |
分子式 | C53H85ClN2O6 | 分子量 | 881.70 |
Ex (nm) | 484 | Em (nm) | 501 |
溶劑 | DMSO | 貯存條件 | -20°C干燥避光保存 |
保質期 | 12個月 | 狀態 | 3~4周 |
分子結構式 |
貨號:22066-100 mg
英文名稱:DiO perchlorate [3,3’-Dioctadecyloxacarbocyanine perchlorate]
中文名稱:熒光染料 DiO高氯酸鹽
規格:100 mg
價格:1195(其他包裝請詢價)
CAS#:34215-57-1
分子式:C53H85ClN2O6
分子量:881.7
Ex(nm):484
Em(nm):501
溶劑:DMSO
儲存條件:−20°C干燥避光保存
保質期:12個月
用途:細胞染色- 細胞膜染色-DiO
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供應商:上海經科化學科技有限公司
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熒光染料DiA,DiD,DiO,DiI,DiR 和 DiS 細胞膜染料
產品描述
熒光染料DiA,DiD,DiO,DiI,DiR 和 DiS 細胞膜染料是一族親脂性的熒光染料,可以用來染細胞膜和其它脂溶性生物結構。當與細胞膜結合后其熒光強度大大增強,這類染料有著很高的淬滅常數和激發態壽命。一旦對細胞染色,這類染料在整個細胞膜上擴散,*濃度時可以使整個細胞膜染色。它們的熒光顏色區分明顯:DiI(橙色熒光),DiO(綠色熒光),DiD(紅色熒光)和 DiR (深紅色熒光)這使得他們可以用來對活細胞進行多色成像和流式分析。DiI和DiO可以分別用標準的 FITC和TRITC的濾光片。DiD可以用 633 nm He–Ne 激光器激發,有著比DiI更長的激發波長和發射波長,在細胞和組織染色中更有價值。 DiR的紅外熒光可以穿透細胞和組織,在活體成像中用來示蹤。
* Omega濾光器由Omega公司提供(www. omegafilters.com);Chroma濾光器由Chroma公司提供(www. chroma.com)。
**DiR的發射波長肉眼不可見,所以需要配備CCD鏡頭或其他的近紅外檢測儀器。
使用方法
1. DiD,DiO,DiI,DiR和DiS細胞膜染色液制備
(1)配置DMSO或EtOH 儲存液:儲存液用 DMSO或EtOH配置濃度1~5 mM。
注意:未使用的儲存液保存在-20 oC,避免反復凍融。
(2)工作液制備:用合適的緩沖液(如:無血清培養基,HBSS或PBS)稀釋儲存液,配制濃度為1~5 µM的工作液。
注意:工作液的zui終濃度是根據不同細胞和實驗的經驗來配制。可以從*濃度的十倍以上尋找*條件。
2. 懸浮細胞染色
(1)懸浮細胞密度為 1 × 106/mL加入到工作液中。
(2)在37 ℃培養細胞 2~20分鐘,不同的細胞*培養時間不同。
(3)染色細胞試管在1000~1500轉離心5分鐘。
(4)傾倒上清液,再次緩慢加入預溫37℃的培養液。
(5)重復(3),(4)步驟兩次以上。
3. 粘壁細胞的染色
(1)使粘壁的細胞在無菌實驗室培養。
(2)從培養基中移走蓋玻片,吸走過量培養液,將蓋玻片放在潮濕的環境中。
(3)在蓋玻片的一角加入100μL的染料工作液,輕輕晃動使染料均勻覆蓋所有細胞。
(4)在37 ℃培養細胞 2~20分鐘,不同的細胞*培養時間不同。
(5)吸干染料工作液,用培養液洗蓋玻片2~3次,每次用預溫的培養基覆蓋所有細胞,培養5~10分鐘,然后吸干培養基。
4. 顯微鏡檢測
(1)DiD,DiO,DiI,DiR和DiS濾光器的選擇參見表1。
(2)多色染料的同時檢測,濾光器按照以下設定:
a) DiI和DiO=Omega XF52,Chroma 51004;
b) DiI和DiD=Omega XF92,Chroma 51007;
c) DiI,DiO和DiD=Omega XF93,Chroma 61005
5. 流式細胞儀的檢測
DiD,DiO,DiI,DiR和DiS 染色的細胞可以分別用經典的FL1,FL2,FL3和FL4流式細胞儀檢測。
儲存條件:-20℃干燥避光保存,有效期一年。