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化工儀器網>產品展廳>試劑標物>行業專用試劑>生化與分子生物學用試劑>BY-1265 RNEEC/HL-012大鼠正常食管上皮細胞系

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BY-1265 RNEEC/HL-012大鼠正常食管上皮細胞系

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供貨周期 現貨 應用領域 化工,生物產業,制藥/生物制藥
RNEEC/HL-012大鼠正常食管上皮細胞系
RNEEC/HL-012大鼠正常食管上皮細胞系作為源自大鼠食管上段黏膜組織的正常上皮細胞模型,因具備食管上段上皮te有的分化表型及穩態維持能力,在食管黏膜屏障穩態調控、食管癌多區域癌變差異及食管上段黏膜損傷修復研究中具有du特jia值,成為探究食管上段上皮生理功能的重要實驗工具。
細胞特性與來源背景:該細胞系源自大鼠食管上段黏膜組織,經原代培養和克隆化篩選獲得。細胞形態呈多邊形,邊界清晰,較 RNEEC/HL-011 細胞略小(直徑約 16-20μm),胞質呈弱嗜酸性,可見散在的透明角質顆粒,細胞核呈橢圓形,核仁不明顯。生長方式為貼壁生長,呈單層緊密排列,接觸抑制現象顯著,傳代后 24 小時貼壁率達 90%。核心參數表現出食管上段上皮特征:倍增時間約 65 小時,較 RNEEC/HL-011 長 5 小時,連續傳代 12 次后仍保持穩定特性;表面標志物表達具有區域特異性,細胞角蛋白 13(CK13)陽性率達 96%,細胞角蛋白 4(CK4)陽性率 94%,EpCAM 陽性率 91%,Ki67 基礎陽性率低于 5%,顯著低于 RNEEC/HL-011;具有正常二倍體核型(42 條染色體),無染色體異常;細胞間連接更為緊密,跨上皮電阻值達 420Ω?cm2,較 RNEEC/HL-011 高 20%,緊密連接蛋白 claudin-4 表達量增加 30%;無微生物污染,細胞純度達 97%,保障實驗結果可靠性。
科研應用價值:在食管黏膜穩態研究中,RNEEC/HL-012 細胞經機械拉伸刺激后,角質形成細胞生長因子(KGF)表達量增加 4.2 倍,絲聚蛋白(Filaggrin)分泌量提升 3.8 倍,較 RNEEC/HL-011 的響應更為顯著,可模擬食管上段應對機械摩擦的穩態調節機制,為解析食管不同區域的屏障適應差異提供對比模型。
食管癌區域差異研究方面,該細胞經亞硝胺處理后,p53 基因突變率為 25%,顯著低于 RNEEC/HL-011 的 38%,但細胞周期蛋白 D1 表達量增加 52%,呈現du特的癌變前分子特征,可用于探究食管上段與中段癌變機制的區域差異。
在反流性食管炎研究中,該細胞在酸刺激(pH=4.0)下,跨上皮電阻值下降 28%,顯著低于 RNEEC/HL-011 的 40%,IL-8 分泌量增加 2.3 倍,表現出更強的酸耐受能力,適用于評估食管上段黏膜保護藥物的特異性療效。此外,該細胞與迷走神經節細胞共培養時,神經肽 Y(NPY)分泌量增加 3.1 倍,可用于探究神經 - 上皮交互作用在食管上段功能調節中的作用。
培養與保存規范:推薦使用含 10% 胎牛血清的 Keratinocyte-SFM 培養基,添加 0.08ng/mL EGF(濃度低于 RNEEC/HL-011)及 1% 抗生素混合液,培養環境為 37℃、5% CO?飽和濕度培養箱。培養基每 3 天更換一次,以維持其緩慢增殖特性。傳代時,用 PBS 沖洗 2 次,加入專用細胞解離液,37℃孵育 10-12 分鐘(較 RNEEC/HL-011 延長 2 分鐘),輕輕吹打使細胞脫落,傳代比例 1:2,每 6-7 天傳代一次,避免頻繁傳代導致分化異常。
凍存液采用培養基 + 10% DMSO+20% 胎牛血清混合液,細胞濃度調整為 1.5×10?個 /ml(低于 RNEEC/HL-011),經程序降溫后液氮保存,復蘇存活率達 83% 以上,3 代內恢復正常功能。運輸采用干冰冷凍或培養瓶活細胞運輸,收到細胞后靜置 24 小時,更換培養基后觀察形態,確認無異常后進行實驗。該細胞系僅限科研使用,操作需符合生物安全規范。
RNEEC/HL-012 大鼠正常食管上皮細胞系以其du特的食管上段上皮表型、更強的屏障穩定性及區域特異性響應特征,在食管區域功能差異研究中具有不可替代的價值,為系統解析食管上皮的區域特異性功能及相關疾病的區域差異機制提供了可靠模型。

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