CAS | 詳詢 | 純度 | 詳詢 |
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分子量 | 詳詢 | 分子式 | 詳詢 |
供貨周期 | 現貨 | 規格 | 50T/24S |
貨號 | BC0160 | 應用領域 | 環保,化工,生物產業,農林牧漁,綜合 |
主要用途 | 土壤β-葡萄糖苷酶(S-β-GC)檢測 |
可見分光光度法
貨號:BC0160
規格:50T/24S
產品組成:使用前請認真核對試劑體積與瓶內體積是否一致,有疑問請及時聯系索萊寶工作人員。
試劑名稱 | 規格 | 保存條件 |
試劑一 | 液體5 mL×1瓶(自備) | 2-8℃保存 |
試劑二 | 粉劑×2瓶 | -20℃保存 |
試劑三 | 液體40 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
試劑四 | 液體80 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
標準液 | 液體1 mL×1支 | 2-8℃保存 |
試劑一:自備甲苯;
試劑二:臨用前取1瓶加入10 mL蒸餾水,充分溶解備用,用不完的試劑建議-20℃分裝保存4周;
標準液:5 mmol/L 的溶液;
標準液的準備:取100 μL標準液,加入到400 μL試劑三中,得到1 mmol/L標準液(即1000 μmol/L),再用蒸餾水十倍稀釋到100 μmol/L。
注意:實驗之前建議選擇2-3個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
需自備的儀器和用品:
可見分光光度計、臺式離心機、水浴鍋/恒溫培養箱、可調式移液器、1mL玻璃比色皿、30-50目篩、冰、甲苯(不允許快遞)和蒸餾水。
操作步驟:
一、樣本處理(可適當調整待測樣本量,具體比例可以參考文獻)
新鮮土樣自然風干或37℃烘箱風干,過30~50目篩。
二、測定步驟
分光光度計預熱30min以上,調節波長至400nm,蒸餾水調零。
用蒸餾水倍比稀釋:50、25、12.5、6.25μmol/L。100、50、25、12.5、6.25μmol/L做標準液,可按下表稀釋。
標準液濃度稀釋表
序號 | 稀釋前濃度(μmol/L) | 標準液體積(µL) | 蒸餾水體積(µL) | 稀釋后濃度(μmol/L) |
1 | 1000 | 100 | 900 | 100 |
2 | 100 | 500 | 500 | 50 |
3 | 50 | 500 | 500 | 25 |
4 | 25 | 500 | 500 | 12.5 |
5 | 12.5 | 500 | 500 | 6.25 |
加樣表:
試劑名稱 | 測定管 | 對照管 | 標準管 | 空白管 |
風干土樣(g) | 0.05 | 0.05 | - | - |
試劑一(μL) | 25 | 25 | - | - |
振蕩混勻,使土樣全部濕潤,室溫放置15min | ||||
試劑二(μL) | 400 | - | - | - |
試劑三(μL) | 500 | 500 | - | - |
混勻,37℃水浴/恒溫培養箱1h后,立即沸水浴煮沸5min(蓋緊纏封口膜,防止水分散失),流水冷卻 | ||||
試劑二(μL) | - | 400 | - | - |
充分混勻,10000g 常溫離心10min,取上清液 | ||||
上清液(μL) | 500 | 500 | - | |
標準液(μL) | - | - | 500 | |
蒸餾水(μL) | - | - | - | 500 |
試劑四(μL) | 1000 | 1000 | 1000 | 1000 |
參考文獻:
Dick W A, Thavamani B, Conley S, et al. Prediction of β-glucosidase and β-glucosaminidase activities, soil organic C, and amino sugar N in reflectance spectroscopy[J]. Soil Biology & Biochemistry, 2013, 56(9): 9e104.
Sestelo A B F, Poza M, Villa T G. β-Glucosidase activity in a Lactobacillus plantarum wine strain[J]. World Journal of Microbiology and Biotechnology, 2004, 20(6): 633.
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