LONZA 4D-Nucleofector細(xì)胞核轉(zhuǎn)染系統(tǒng)，即原德國Amaxa 4D-Nucleofector核轉(zhuǎn)系統(tǒng)，結(jié)合電穿孔技術(shù)和細(xì)胞特異性轉(zhuǎn)染液，通過系統(tǒng)內(nèi)置優(yōu)化的轉(zhuǎn)染程序，將外源基因高效導(dǎo)入目標(biāo)細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中，并可直接入核，整合到細(xì)胞染色體中。

LONZA 4D-Nucleofector 細(xì)胞核轉(zhuǎn)染系統(tǒng)及轉(zhuǎn)染試劑盒

LONZA 4D-Nucleofector核轉(zhuǎn)系統(tǒng)可用于免疫細(xì)胞、干細(xì)胞、神經(jīng)細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞等較難轉(zhuǎn)染的原代細(xì)胞和各類細(xì)胞系中，其不依賴于病毒感染、不依賴于細(xì)胞有絲分裂，可加快基因表達(dá)，已成功轉(zhuǎn)染1200余種細(xì)胞系、130余種原代細(xì)胞，多數(shù)細(xì)胞系轉(zhuǎn)染效率可高達(dá)50-70%，部分原代細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率可超過90%。目前，LONZA 4D-Nucleofector已大量應(yīng)用于CAR-T細(xì)胞的研究中。

LONZA 4D-Nucleofector細(xì)胞核轉(zhuǎn)染系統(tǒng)操作示意圖

圖.使用Nucleofector核轉(zhuǎn)系統(tǒng)，將GFP標(biāo)記的質(zhì)粒轉(zhuǎn)染新生兒皮膚成纖維細(xì)胞（NHDF-neo），2小時后用3.5% PFA 固定，共聚焦顯微鏡可觀察到GFP蛋白在細(xì)胞核內(nèi)表達(dá)。

LONZA 4D-Nucleofector細(xì)胞核轉(zhuǎn)染系統(tǒng)，配備多種轉(zhuǎn)染模塊，可滿足不同細(xì)胞類型、不同數(shù)量、不同通量的轉(zhuǎn)染實驗需求；

 電轉(zhuǎn)過程中配合使用不同細(xì)胞類型轉(zhuǎn)染試劑，轉(zhuǎn)染效率遠(yuǎn)高于傳統(tǒng)電轉(zhuǎn)儀；

 采用由新型高分子聚合物制造的電極，相比傳統(tǒng)鋁制電轉(zhuǎn)杯，杜絕金屬離子毒害，細(xì)胞轉(zhuǎn)染后成活率更高。

 為提高細(xì)胞核轉(zhuǎn)染效率，優(yōu)化轉(zhuǎn)染條件*，相比其他品牌，LONZA可提供共享的數(shù)據(jù)庫，可檢索到700種以上的細(xì)胞轉(zhuǎn)染數(shù)據(jù)和操作手冊，除轉(zhuǎn)染操作指導(dǎo)外，還提供細(xì)胞來源、傳代、生長條件、培養(yǎng)基、轉(zhuǎn)染后細(xì)胞培養(yǎng)基等各類技巧，大大節(jié)省摸索時間和試劑耗材損耗。

 LONZA 4D-Nucleofector細(xì)胞核轉(zhuǎn)染平臺，在小體積轉(zhuǎn)染條件優(yōu)化成功后，可不改變轉(zhuǎn)染條件，直接用于大體積轉(zhuǎn)染中，一次獲得多1*10^9數(shù)量的細(xì)胞，大大縮短實驗時間。

LONZA 4D-Nucleofector細(xì)胞核轉(zhuǎn)染系統(tǒng)，由1個主機(jī)加不同模塊構(gòu)成，各模塊可單獨配置：

1、C模塊（必選）：細(xì)胞核轉(zhuǎn)染系統(tǒng)主機(jī)，即核心模塊（Core unit），內(nèi)置各類細(xì)胞轉(zhuǎn)染程序。

 2、X模塊（可選）：一般應(yīng)用選擇的小體積轉(zhuǎn)染模塊，用于各類懸浮細(xì)胞轉(zhuǎn)染。允許使用2個電極杯和1個中通量16孔電極板條。其中電極杯為100uL體系，適用于2*10^5至2*10^7數(shù)量細(xì)胞；16孔電極板條各孔為20uL體系，適用于2*10^4至1*10^6數(shù)量細(xì)胞，可同時轉(zhuǎn)染16個樣品。

組合：C模塊+X模塊

 3、Y模塊（可選）：用于各類貼壁細(xì)胞的原位轉(zhuǎn)染，無需消化細(xì)胞。允許使用1個24孔電極板，各孔為350uL體系，可同時轉(zhuǎn)染24個樣品。

組合：C模塊+Y模塊

 4、LV模塊（可選）：用于一種細(xì)胞的大規(guī)模連續(xù)轉(zhuǎn)染。允許使用電轉(zhuǎn)盤，其中小體積電轉(zhuǎn)盤允許手動注射填充1mL，適用于1*10^7至1*10^8數(shù)量細(xì)胞；更大體積的電轉(zhuǎn)盤允許以1mL體積不斷進(jìn)樣，配合儲液罐或儲液袋，連續(xù)處理20mL體積，上限可轉(zhuǎn)染10^9數(shù)量細(xì)胞。

組合：C模塊+LV模塊

 5、96孔模塊（可選）：用于高通量細(xì)胞轉(zhuǎn)染，需要同時配置X模塊。允許使用1個可拆卸的96孔電極板，由6個16孔電極板條組成，適用于2*10^4至1*10^6數(shù)量細(xì)胞，可同時轉(zhuǎn)染96個樣品，經(jīng)常用于摸索轉(zhuǎn)染條件。

組合：C模塊+X模塊+96孔模塊