牛白細胞介素12（IL-12）elisa試劑盒目的 研究白細胞介素-12(IL-12),IL-18和IL-10在結核病免疫發病機制中的作用,為設計新的疫苗和開展輔助性免疫療法提供依據.方法 用ABC-酶聯免疫吸附試驗(ABC-ELISA)及雙抗體夾心ELISA試劑盒檢測39例結核性胸腔積液患者胸水中和血清中的IL-12,IL-18, IL-10水平.對結果進行顯著性檢驗及相關性分析,并對治療好轉過程中的10例繼發型肺結核和5例結核性胸膜炎患者的這3種細胞因子在胸水中的變化進行 觀測.結果 除IL-18外,其他兩種細胞因子在胸水中與血清中含量差異有統計學意義;只有IL-12與IL-10之間有相關關系.治療好轉過程中,絕大多數患者有 IL-12,IL-18水平增高和IL-10水平降低.結論 IL-18用作疫苗佐劑可能優于IL-12,這3種細胞因子均可用于開展免疫療法,但不可一概而論.

白細胞介素-18(IL-18)是一種重要的細胞因子,它能作用于I型輔助性T細胞(Th1),并在IL-12的協同作用下能強烈誘導其產生IFN-γ。近來研究表明:IL-18具有廣泛的生物學活性,在介導細胞免疫、抵抗微生物感染和抗腫瘤方面起著重要的作用。因此,IL-18在臨床上可作為免疫增強劑、抗微生物或抗腫瘤制劑得以應用。到目前為止,國內外已有人、小鼠、猴、豬、牛和羊等種屬的IL-18商品化制劑及其相應的單克隆抗體(McAb)或多克隆抗體(PcAb)以及夾心ELISA試劑盒的商品化供應。然而,有關馬IL-18(EIL-18)的研究較少且相對滯后,迄今為止,還未見有可供商品化的EIL-18和抗EIL-18 McAb或PcAb及其夾心ELISA試劑盒等相關產品。 本研究采用RT-PCR從經ConA刺激的馬外周血單核細胞(PBMCs)中擴增獲得編碼EIL-18前體蛋白(precursor EIL-18,pEIL-18)的DNA,然后克隆至載體pMD18-T中,鑒定正確的重組質粒命名為pMD-EIL-18。自pMD-EIL-18中分別擴增pEIL-18及其成熟蛋白(mature EIL-18,mEIL-18)基因,并將其亞克隆至原核表達載體pET-28a(+)和pET-26b(+)中,重組質粒鑒定正確后命名為pET-pEIL-18、pET-EIL-18和pET-mEIL-18。然后分別轉化至大腸桿菌感受態BL21(DE3)中進行誘導表達牛白細胞介素12（IL-12）elisa試劑盒