70295 猴Ⅲ型前膠原氨基端原肽elisa試劑盒
- 公司名稱 廈門侖昌碩生物科技有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號(hào) 70295
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時(shí)間 2023/10/12 10:33:46
- 訪問次數(shù) 417
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集研發(fā)、生產(chǎn)、銷售、服務(wù)及品牌代理為一體的生物技術(shù)公司，目前可提供各種抗體、免疫學(xué)相關(guān)的檢測(cè)試劑盒、胎牛血清，動(dòng)物抗血清等高品質(zhì)產(chǎn)品及服務(wù)，涵蓋分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、免疫學(xué)等生命科學(xué)領(lǐng)域。
| CAS | 原裝,質(zhì)量問題包退換 | 純度 | 咨詢 |
|---|---|---|---|
| 分子量 | 咨詢 | 分子式 | 實(shí)驗(yàn)試劑 |
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 96T/48T |
| 貨號(hào) | 70295 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè) |
| 主要用途 | 科研使用 |
目的:基于課題組前期實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)益肺散結(jié)方可減輕COPD小氣道重塑及延緩肺纖維化進(jìn)展的基礎(chǔ)上,本課題進(jìn)一步研究益肺散結(jié)方逐瘀作用的分子機(jī)制.本課題選取方中逐瘀藥莪術(shù)的主要成分姜黃素,莪術(shù)醇干預(yù)人肺成纖維細(xì)胞,觀察其對(duì)膠原合成及自噬水平的影響,探討其是否通過調(diào)控自噬干預(yù)人肺成纖維細(xì)胞膠原合成,從而闡述益肺散結(jié)方逐瘀作用的分子機(jī)制,為臨床應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)和理論基礎(chǔ)參考.方法:體外培養(yǎng)人肺成纖維細(xì)胞(HLF),以TGF-β1刺激成纖維細(xì)胞使之分化為肌成纖維細(xì)胞.不同濃度姜黃素,莪術(shù)醇為實(shí)驗(yàn)組.加入CQ的為抑制劑組.以雷帕霉素干預(yù)作為陽(yáng)性對(duì)照組.為檢測(cè)膠原合成,使用消化法羥脯氨酸(HYP)檢測(cè)試劑盒檢測(cè)各組細(xì)胞的HYP含量;Q-PCR法檢測(cè)纖維化相關(guān)基因α-SMA表達(dá)水平;使用Western Blot檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)Ⅰ型膠原蛋白(COL-Ⅰ)和Ⅲ型膠原蛋白(COL-Ⅲ)表達(dá)情況;使用Elisa法檢測(cè)Ⅰ型前膠原氨基端肽(PⅠNP),III型前膠原氨基端肽(PIIINP),人脯氨酸羥化酶(PHD)的含量.為檢測(cè)自噬水平,使用透射電鏡觀測(cè)自噬小體形成情況;Q-PCR法檢測(cè)自噬相關(guān)基因Beclin1,ATG 7表達(dá)水平;Western Blot檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)LC3B-Ⅱ蛋白,p62蛋白表達(dá)情況.結(jié)果:1.與模型組相比,不同濃度的姜黃素對(duì)TGF-β1誘導(dǎo)的人肺成纖維細(xì)胞模型12h后的調(diào)節(jié)作用如下:1.1α-SMA的mRNA轉(zhuǎn)錄水平及HYP含量均有不同程度降低(P0.05).1.2 8μg/mL姜黃素組PⅠNP降低(P0.05).16μg/mL,32μg/mL的姜黃素組PⅠNP均有不同程度降低(P0.05).8μg/mL,16μg/mL,32μg/mL的姜黃素干預(yù)后PIIINP降低(P0.05).8μg/mL,16μg/mL,32μg/mL的姜黃素組PHD降低,僅8μg/mL,32μg/mL的姜黃素組的差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05).32μg/mL的姜黃素組COL-Ⅰ,COL-Ⅲ合成水平均有不同程度降低,但是僅COL-Ⅰ差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05).1.3自噬小體增多,Beclin1,LC3B,ATG7的mRNA轉(zhuǎn)錄情況均有不同程度升高,但是僅16μg/mL,32μg/mL的姜黃素組Beclin1的差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);LC3B-Ⅱ蛋白表達(dá)增多(P0.05);p62蛋白表達(dá)減少(P0.05).1.4在氯喹抑制自噬后,姜黃素干預(yù)組PⅠNP,PIIINP,PHD含量及COL-Ⅰ,COL-Ⅲ表達(dá)仍有不同程度降低,但姜黃素的藥效被削弱(P0.05).2.與模型組相比,不同濃度的莪術(shù)醇對(duì)TGF-β1誘導(dǎo)的人肺成纖維細(xì)胞模型12h后的調(diào)節(jié)作用如下:2.1α-SMA的mRNA轉(zhuǎn)錄水平及HYP含量均有不同程度降低(P0.05).2.2 8μg/mL莪術(shù)醇組PⅠNP稍有降低(P0.05).16μg/mL,32μg/mL的莪術(shù)醇組PⅠNP均有不同程度降低(P0.05).8μg/mL,16μg/mL莪術(shù)醇組PIIINP稍有降低(P0.05).32μg/mL的莪術(shù)醇組PIIINP降低(P0.05).8μg/mL的莪術(shù)醇組PHD略有增高(P0.05).16μg/mL,32μg/mL莪術(shù)醇組PHD含量降低,(P0.05).32μg/mL的莪術(shù)醇組COL-Ⅰ,COL-Ⅲ合成水平均有不同程度降低,但是僅COL-Ⅲ的差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05).2.3莪術(shù)醇促使自噬小體增多,Beclin1,LC3B,ATG7的mRNA轉(zhuǎn)錄情況均有不同程度升高,但是僅16μg/mL,32μg/mL的莪術(shù)醇組Beclin1的差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05).與模型組相比,LC3B-Ⅱ蛋白表達(dá)增多(P0.05);p62蛋白表達(dá)減少(P0.05).2.4使用氯喹抑制自噬后,莪術(shù)醇干預(yù)組HYP含量及PⅠNP,PIIINP和COL-Ⅰ,COL-Ⅲ表達(dá)量均較模型組下降,但莪術(shù)醇的藥效被削弱.結(jié)論:1.莪術(shù)的主要成分姜黃素,莪術(shù)醇能減少HLF細(xì)胞α-SMA表達(dá)并降低HYP,PⅠ/IIINP,PHD,COL-Ⅰ/Ⅲ含量,具有降低HLF細(xì)胞膠原合成的作用.2.莪術(shù)的主要成分姜黃素,莪術(shù)醇可增加HLF細(xì)胞自噬小體形成,提高Beclin1,ATG 7表達(dá)水平增加,LC3B-Ⅱ蛋白表達(dá),具有激活HLF細(xì)胞自噬的作用.3.莪術(shù)的主要成分姜黃素,莪術(shù)醇激活自噬可能是其減少HLF細(xì)胞膠原合成的機(jī)制之一.
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