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TSKgel 高效篩選抗體ADCC活性色譜柱

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綠百草科技發展有限公司是一家從事色譜層析、純化、天然產物提取、分離技術的開發、技術服務、技術培訓的科技型公司,專業代理國內外純化介質、填料、色譜柱、實驗室儀器設備、耗材、試劑、生產用動態軸向加壓柱系統。公司位于高科技企業密集的北京中關村科技園區。 綠百草公司以的技術和產品,在天然產物提取物、中藥、西藥、生物制藥、食品、環境監測、石化、新材料等領域向廣大科研工作者和生產廠提供*的服務。



色譜層析、純化、天然產物提取、分離技術的開發、技術服務、技術培訓的科技型公司,專業代理國外純化介質,填料、色譜柱、實驗室儀器設備、耗材、試劑、生產用動態軸向加壓柱系統。綠百草科技主要代理:日本三菱化學公司、日本YMC公司、日本TOSOH公司、日本NACALAI TESQUE公司、日本DAICEL公司、日本隹友SCAS公司、德國默克MEICK公司、美國SEPAX TECHNOLOGIES公司、美國USP、英國Chrom Tech、美國Waters.

供貨周期 現貨 應用領域 環保,生物產業

TSKgel 高效篩選抗體ADCC活性色譜柱 在單克隆抗體藥物的初期研發階段中,通過對細胞株實施篩選,選出能產生滴度較高、ADCC活性較高的細胞株。此時常會用到的幾種評估方法是,通過生物檢定法測定ADCC活性;通過表面等離子共振法(SPR)測定人體IgG受體(Fcγa等)的親和力;通過LC/MS分析抗體酶切下來的糖鏈結構等。但這些方法都需要花費大量的時間和人力。

能夠把這些復雜的評估分析法由繁化簡,并快速完成分析的HPLC色譜柱就是TSKgel FcR-IIIA-NPR

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TSKgel 高效篩選抗體ADCC活性色譜柱使用TSKgel FcR-IIIA-NPR色譜柱可以直接分離抗體,無需對細胞培養液進行前處理。抗體主要可以分離出3個洗脫峰。已有研究表明,抗體糖鏈末端的半乳糖數量越多,在此色譜柱中的保留能力越強,而保留能力越強的洗脫峰,其ADCC活性就越高

細胞培養液中單克隆抗體的分離

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TSKgel FcR-IIIA-NPR色譜柱可以用來測定和監控細胞培養時抗體糖鏈的性狀變化。取不同培養天數的細胞培養液,使用Protein A填料對抗體樣品粗純后,再采用TSKgel FcR-IIIA-NPR色譜柱分析的結果如圖所示。

抗體細胞培養天數和產生抗體的變化

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隨著培養天數的延長,抗體的3個洗脫峰會向前側的洗脫峰位移。雖然延長了細胞培養天數,抗體的絕對產量增加,但是由于受到細胞外糖鏈修飾酶的影響,在色譜柱中的保留能力較高的抗體(多糖的末端半乳糖數量較多的抗體)的洗脫峰反而減少了。因此,可以推定產生的抗體的ADCC活性已經降低。

TSKgel FcR-IIIA-NPR的主要分析用途

①確認不同細胞株 (CHO細胞、HEK細胞等) 中抗體的性狀變化。

②確認多個細胞株篩選時抗體的性狀變化。

③確認當改變細胞培養基添加劑時抗體的性狀變化

④細胞培養過程中隨培養天數的變化導致抗體性狀變化的確認。

⑤細胞培養規模放大 (更改培養方法) 時,確認抗體是否發生性狀變化。



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