一、新一代高通量單細胞測序系統(tǒng)的原理：
10x Genomics自2016年進軍單細胞領(lǐng)域以來，最開始以經(jīng)典款儀器——Chromium Controller不斷開發(fā)新應(yīng)用，解鎖單細胞多組學(xué)。隨后，為了解放科研人員的雙手，減少人為誤差，又推出了單細胞捕獲自動化工作站—— Chromium Connect。然而，就在最近，為了滿足科研工作者對更高通量單細胞捕獲的需求，10x 推出了Chromium X，即百萬單細胞捕獲的神器，帶您探索更多可能！

當(dāng)10x Genomics的Chromium Controller問世以來，科學(xué)家就驚嘆于它的高通量，一次上機，八個通道，高通量可做到捕獲8萬個單細胞。如此高的通量和單細胞分辨率大大提速了科研工作者的研究，新的發(fā)現(xiàn)，新的成果層出不窮，高分文章發(fā)發(fā)發(fā)不停！

但是，通過對近幾年單細胞文章捕獲的細胞數(shù)量的統(tǒng)計，我們也會發(fā)現(xiàn)，現(xiàn)在文章中所涉及到的細胞數(shù)目也越來越多了，更多的單細胞數(shù)據(jù)，有助于我們拿到更好的實驗結(jié)果。

三、并且，在我們面對一些特定的科學(xué)問題的時候，我們確實是需要百萬級別的單細胞才能解開一個真相，比如說：

（1）人類器官圖譜構(gòu)建。對于一個器官而言，其細胞的多樣性絕不是幾萬甚至幾十萬個細胞就能*描繪的，我們需要做到百萬級別的細胞數(shù)量，才能全面的描繪一個器官所有的細胞類型，這個時候，Chromium X無疑是我們更好的選擇！

（2）CRISPR篩選。在CRISPR單細胞篩選的過程中，一般需要將一種gRNA導(dǎo)入到80-100個細胞中，然后看其對基因的擾動。如果我們有一個1萬條gRNA的庫，那么我們就需要捕獲百萬級別的單細胞來進行CRISPR篩選，這個時候，Chromium X將是我們研究的利器！

（3）T/B細胞克隆亞型分析。對于免疫研究的老師，大家都知道TCR/BCR的克隆亞型極其豐富，如果我們只測幾萬個細胞，是很難覆蓋所有的克隆亞型的，這個時候，Chromium X將給您帶來更大的幫助！

更重要的一點是，如果您使用Chromium X進行高通量單細胞捕獲，還可以大大降低單個細胞的捕獲成本。

Chromium X的單細胞捕獲原理還是基于Next GEM的微流控捕獲原理，細胞和反應(yīng)試劑及Geal Beads被包裹在一個油滴里。每個油滴形成一個微反應(yīng)體系，同細胞里的RNA被標(biāo)記上相同的10x Barcoded。測序后，對單細胞數(shù)據(jù)進行拆分。不過，Chromium X有16個通道，每個通道最多可以捕獲2萬個單細胞。此外，現(xiàn)在10x Genomics的儀器還支持混樣（CellPlex），一個通道最多可以混12個樣本，混樣后，一個通道最多可以拿到4.6萬個單個細胞，一次上機，最多可以拿到73萬個單個細胞（該數(shù)字是去除雙細胞拿到的最終單個細胞數(shù)量）。雙細胞捕獲率為0.4%/1000個細胞。上機一次運行的時間不超過18min。此外，X還加入了溫控裝置，確保拿到的數(shù)據(jù)質(zhì)量更高。

五、Chromium X，可以做哪些應(yīng)用？

高通量版本的Chromium X，不僅可以實現(xiàn)之前的Chromium Controller的單細胞3端轉(zhuǎn)錄組解決方案，同時還可以進行細胞表面蛋白的檢測，CRISPR單細胞大規(guī)模篩選，靶向捕獲，及混樣（CellPlex）；還可以實現(xiàn)基于5端RNA捕獲的單細胞免疫組解決方案，檢測單細胞全長配對的VDJ序列，細胞表面蛋白檢測，抗原特異性檢測，靶向捕獲，CRISPR篩選（2022年推出），混樣（2022年推出）。此外Chromium X還可以兼容Chromium Controller 的試劑和芯片。也就是說，您可以直接將八個通道的Chromium Controller芯片用于Chromium X上，并且這個時候，我們就可以在Chromium X上實現(xiàn)Chromium Controlle的所有應(yīng)用，如單細胞ATAC，單細胞ATAC+mRNA等。

• 重量 ：18.8 kg

• 體積：寬 x 深 x 高=28.6 厘米x 48.3 厘米x 27.3 厘

• 電氣要求：100–240 VAC, 50/60 Hz, 250 W，90–264 V 工作范圍（額定值的 +/- 10%），過壓類別 II（標(biāo)準(zhǔn)插座）

• 工作溫度：18–28°C

• 濕度：30–80% R.H. 非冷凝

• 海拔高度：0-2286 米

• 電源線長度：2 m-包括特定國家/地區(qū)的適配器
  

七、Chromium X 數(shù)據(jù)展示：

10x內(nèi)部數(shù)據(jù)測試，在Chromium X上用Chromium Controller的芯片和試劑（可以叫做標(biāo)準(zhǔn)試劑芯片）進行單細胞轉(zhuǎn)錄組，免疫組，ATAC及ATAC+mRNA的實驗，然后與Chromium Controller儀器上獲得的數(shù)據(jù)進行對比，發(fā)現(xiàn)二者的相關(guān)性系數(shù)很高，說明Chromium X*兼容Chromium Controller的芯片和試劑，所以大家不必有顧慮！

八、此外，10x還在Chromium X上做了使用高通量試劑芯片和標(biāo)準(zhǔn)試劑芯片的數(shù)據(jù)比較。實驗中使用新鮮骨髓穿刺樣本，獲取單細胞懸液，用130個抗體進行孵育，然后過流式篩選孵育上抗體的細胞，然后分別進行Chromium X高通量單細胞捕獲和Chromium X標(biāo)準(zhǔn)通量捕獲，最終標(biāo)準(zhǔn)通量捕獲到8269個細胞，高通量捕獲到17581個細胞，然后進行單細胞轉(zhuǎn)錄組，VDJ，細胞表面蛋白的檢測。

九、根據(jù)檢測結(jié)果，我們發(fā)現(xiàn)，高通量捕獲的細胞數(shù)量多，更能檢測出一些稀有的細胞類型，以及低豐度的TCR克隆亞型。

十、斑馬魚（北京）科技有限公司是10x Genomics公司的經(jīng)銷商，為您提供參數(shù)，報價，實驗指導(dǎo)，安裝培訓(xùn)，售后等服務(wù)。