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過敏性哮喘動物模型

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 上海申知心生物科技有限公司(簡稱“申知心生物”),是一家“提供全面、系統、高質量的心血管相關疾病研究服務平臺”的創新型企業,致力于搭建基礎醫學和臨床轉化服務體系并開展基于藥效學評價的臨床前CRO服務,提供各種成熟的心血管疾病模式動物。公司投資建立的動物實驗中心,建有清潔級、SPF級動物實驗室,面積約1800平米。為科研院所、臨床科室及醫藥企業提供專業定制化的動物模型、藥物篩選、藥理藥效評價、安全性評價、病理分析及分子生物學檢測等服務。

 

 申知心生物擁有專業的技術團隊,核心成員來自中科院、復旦、交大、同濟等國內重點高校及科研機構,并與心血管病研究所保持密切合作,能夠提供完善的實驗技術咨詢與服務。

 

 

 

 

心血管疾病動物模型,動脈粥樣硬化模型,高血脂癥動物模型,缺血性心臟病動物模型,心肌病動物模型,高血壓動物模型,肺動脈高壓動物模型,心血管模型,心血管相關原代分離

過敏性哮喘動物模型實驗服務介紹:

BALB/c小鼠于第0天和第14天分別腹腔注射OVA液和DBP溶液,第21~23天連續3天以OVA溶液霧化激發,每天于上午下午固定時間霧化2次,每次20min。霧化過程中觀察小鼠一般行為變化,后一次霧化結束后24小時,小鼠摘眼球取血,取支氣管肺泡灌洗液及肺組織。

一般行為學觀察  觀察小鼠在霧化過程中是否出現撓臉、毛發豎立、呼吸急促、煩躁不安、大小便失禁等現象。

血中Eos計數    后一次霧化激發結束24h后,小鼠摘眼球取血,獲得血液后立即取出20 μl與380μl 嗜酸性粒細胞稀釋液混勻,利用細胞計數板于光學 顯微鏡下進行Eos計數。

血清中IgE測定   將獲得的血液靜置2h后,離心,3500 rpm,15min,取血清,按IgE ELISA試劑盒說明書進行測定,并通過樣本總蛋白含量進行結果校正。

BALF細胞分類計數  將小鼠仰臥位固定,打開胸腔后,結扎右肺及左側肺上葉。分離并暴露氣管,用適宜針頭進行插管,以預冷PBS反復灌洗肺組織(0.5 mL/次,共兩次),收集BALF,低溫離心( 3500 rpm,10min ),取上清,保存于-20℃待測。細胞沉淀用0.2 mL預冷PBS重懸,吹打均勻后取10 μl于細胞計數板上在光學顯微鏡下計細胞總數,剩余細胞懸液涂片,用快速瑞姬氏染液染色,顯微鏡下進行細胞分類計數。

BALF中IL-4、IL-5、IL-9、IL-13、IFN-γ的測定  將獲得的BALF上清根據相關細胞因子檢測試劑盒的說明書進行各指標定量檢測,測定結果經總蛋白含量校正。

肺組織中IL-4和IFN-γ的測定  將右側肺組織用預冷的PBS研磨得15 % 組織勻漿,低溫離心,3500 rpm,15min,取上清按照 ELISA 測定試劑盒的操作步驟進行IL-4和IFN-γ測定,并通過樣本總蛋白定量來進行校正。

肺組織HE及PAS染色  剪取左肺上葉,置10%中性福爾馬林中固定,石蠟包埋,常規石蠟包埋,切片,HE及PAS染色,鏡下觀察肺組織炎性細胞浸潤及黏性蛋白增生情況。


分子實驗平臺:高效運作了qRT-PCR、Western blot、雙向電泳技術、分子克隆與質粒構建、流式細胞儀檢測、免疫共沉淀、染色質免疫共沉淀、RNA免疫沉淀、凝膠電泳遷移實驗、酶聯免疫吸附測定、外泌體抽提及鑒定等實驗。

基因組學平臺:可以完成甲基化檢測、基因芯片分析、高通量測序等實驗。

蛋白組學平臺:能實現LC-MS、ITRAQ、蛋白質修飾分析等重點實驗項目。

病理學平臺:涉及免疫熒光染色、免疫組織化學染色、HE染色、特殊染色等實驗。

臨床前CRO服務:主要提供呼吸系統、神經系統、免疫系統性疾病的藥效學評價服務,包括靶點驗證、體內外模型的構建、藥物篩選、藥物分析、藥效性評價、藥代

動力學和藥理學研究以及院內制劑研發等。

項目轉化服務:助力客戶進行方案設計、聯合課題申報、藥物項目引進和孵化,解決客戶對實驗技術平臺、專業人和融資的需求。




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