組織RNA保存液 （RNA Later）

產品描述

組織RNA保存液（RNA Later）（下文簡稱“RNA Later”）是一種液態、無毒的組織保存試劑，能迅速穩定組織，保護非冷凍細胞RNA于原位且不會導致RNA的降解。可廣泛應用于多種脊椎動物樣本（包括腦、心、腎、脾、肝、睪丸、骨骼肌、脂肪、肺和胸腺），對大腸桿菌、果蠅、組織培養細胞、全血細胞和一些植物也有效。

RNA Later不會影響樣品的后續處理，可以配合各種常見的 RNA抽提試劑盒使用，例如TRIzol（Cat#AN51L758）、RNAzol、各種RNA提取試劑盒、酚抽法以及利用Oligo（dT）原理的mRNA抽提試劑。

訂購信息

運輸與保存

常溫運輸。常溫保存，有效期12個月。

使用方法（只能用于新鮮組織，在浸入RNA Later之前不能冷凍組織）

1. 根據要保存的各樣本的體積，計算出所需RNA Later用量（應當是組織體積的5倍；離心收集2×10⁶細胞RNA Later的用量是1mL）。

2. 將RNA Later按需要量分裝入自備保存管中。

3. 快速將較大的組織切成切割至每個方向（長度、寬度或厚度）均<0.5 cm，立即浸入RNA Later中（確保RNA Later能夠滲透組織）。較小的組織（如大鼠的腎臟、脾臟，小鼠的大部分器官）取下后可以直接浸入RNA Later。

4. 保存時先將樣本浸入RNA Later后置4℃冰箱過夜（4℃過夜是必需的，這樣可使RNA Later滲入到組織中），然后去除上清液（也可留存），再轉移至-20°C或-80°C進行長期保存。

注：樣本在-20℃條件下不會凍結，但在存貯緩沖液中會有結晶形成，這并不影響隨后的RNA提取。樣本在-80℃條件下會凍結，測試表明，在RNA Later中保存的標本，反復凍融至室溫20次不影響RNA的質量。

5. RNA Later 中樣本的RNA提取：

(1)       組織：用消毒鑷子將組織從存貯溶液RNA Later中取出，浸泡在RNA提取溶液中。一旦將組織放入RNA提取溶液中，勻漿一定要迅速進行。

(2)       細胞：從存貯在RNA Later中的細胞中提取RNA有兩種操作方法可供選擇：去除RNA Later或者從細胞與RNA Later的混合物中直接提取RNA。

注意事項

1. 本產品僅限于科學實驗研究使用，不得用于臨床診斷、治療等領域。

2. 本產品在4℃條件下會引起沉淀，加熱到37℃即可澄清。

3. 使用RNA Later：

(1)       動物組織：RNA Later不會溶解或破壞組織樣本的結構。如果需要的話，仍可將已經平衡在RNA Later溶液中的組織取出并分割成更小的塊再重新放入到RNA Later中。

(2)       植物組織：許多植物組織可以簡單浸泡在5倍體積的RNA Later中保存。具有自然屏障防止擴散的植物如蠟表皮的葉組織可能需要先破壞其屏障，以允許RNA Later進入組織。

(3)       培養細胞：沉淀細胞，先用PBS洗一次，再用少量的PBS懸浮細胞，然后加5~10倍體積的RNA Later保存。

(4)       白細胞：如果將白細胞從紅細胞和血清中分離出來，并按組織培養細胞一樣處理后，白細胞便能有效地保存在RNA Later中。不要將全血、血漿或血清中的RNA保存在RNA Later中，因為它們蛋白含量過高，與RNA Later混合后易形成不溶的沉淀。

(5)       細菌：RNA Later是抑菌的，雖然細菌在RNA Later中不能生長，但細胞仍保持其完整性。大腸桿菌保存在RNA Later中4℃條件下1個月仍很完整，產生不降解的RNA。

4. 去除RNA Later：因為RNA Later的濃度比典型的細胞培養介質的濃度高，因此用通常沉淀活細胞的離心力無法沉淀RNA Later中的細胞（HeLa細胞大約需要5000g）。

5. 對于多數在 RNA later 溶液樣本，在缺乏-20°C或-80°C長期保存條件時，RNA樣本可通過以下方式短期保存： ①4°C保存長達 1 個月，RNA 不會出現顯著降解；②25°C保存長達 1 周，RNA 質量不會顯著下降。但2 周后，RNA 通常會出現輕微降解（尚可滿足 Northern 印跡分析的基本要求，仍適用于核酸酶保護實驗或 RT-PCR 分析）；③37°C下24小時內RNA完整，3天后部分降解。

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