核酸提取儀的校準需依據JJF 1874-2020《(自動)核酸提取儀校準規范》進行，主要涵蓋以下關鍵內容：

一、校準適用范圍

?設備類型?：適用于全自動/半自動核酸提取儀，包括磁珠法和離心柱法原理的設備，通量范圍1-96樣本/批次。

?核心系統?：需校準溫控系統、振蕩系統、取液系統及分離純化系統等模塊。

二、計量特性要求

需校準以下關鍵參數：

?溫度相關?：示值誤差、均勻性、穩定性（如37℃/95℃雙溫度點測試）；

?振動頻率?：示值誤差及穩定性（范圍0.1-500Hz）25；

?取液系統?：取液量示值誤差、重復性及一致性（使用電子天平，分度值0.1mg）；

?提取效率?：核酸回收率（需≥90%）、重復性及交叉污染率（棋盤法驗證假陽性率）。

三、校準條件與設備

?環境要求?：溫度10-30℃、濕度≤80%，無機械振動和電磁干擾。

?標準設備?：

溫度測量裝置（MPE±0.3℃）；

振動頻率測量儀（0.1級）；

電子天平（分度值0.1mg）；

核酸標準物質（濃度≥1000ng/μL，Urel≤5%）。

四、典型校準流程示例

?提取效率校準?：

使用梯度濃度DNA標準品（10-10? copies/μL），提取后通過qPCR檢測回收濃度，計算效率η=(C提取后/C初始)×百分之一百。

?交叉污染驗證?：

96孔板交替排布陽性/陰性樣本，檢測陰性樣本假陽性率。

?溫控模塊測試?：

探頭布點于加熱模塊幾何中心及邊緣，采樣間隔≤10s，判定ΔT=Tmax-Tmin。

五、常見問題與整改

?提取效率低?：可能因磁棒磁力衰減（需≥800mT）或移液量偏差（如設定100μL實際80μL），需更換磁棒或校準移液泵。

?交叉污染超標?：多由吸頭更換機構卡滯或廢液槽氣溶膠回流引起，需清潔機械導軌并增加紫外消殺。