總膽固醇（TC）含量檢測試劑盒

注意：正式測定前務必取 2-3 個預期差異較大的樣本做預測定。

產品簡介：

總膽固醇（Total Cholesterol，TC）是指所有脂蛋白所含膽固醇的總和，包括游離膽固醇和膽固醇酯。

利用酯酶催化膽固醇酯水解生成游離膽固醇（FC）和游離脂肪酸（FFA），從而把膽固醇酯轉化為 FC；進一步利用膽固醇氧化酶催化 FC 氧化，生成△4-膽甾烯酮和 H₂O₂；最后利用過氧化物酶催化H₂O₂ 氧化 4-氨基安替比林和酚，生成紅色醌類化合物，其在 500nm 有特征吸收峰，其顏色深淺與TC 含量成正比。

試驗中所需的儀器和試劑：

可見分光光度計、天平、低溫臺式離心機、玻璃比色皿、可調式移液槍、

EP 管、蒸餾水、異丙醇。

產品內容：

提取液：異丙醇 50mL×1 瓶，自備，4℃保存； 工作液：液體 60mL×1 瓶，4℃保存；

標準品：粉劑×1支，10mg 膽固醇，4℃保存。臨用前加入517μL提取液，振蕩溶解，即為50μmol/mL 的膽固醇標準溶液。

操作步驟：

一、樣本處理：

1. 組織：按照組織質量（g）：提取液體積(mL)為 1：5~10 的比例（建議稱取約 0.1g 組織，加入 1mL

提取液）進行冰浴勻漿。10000g，4℃離心 10min，取上清置冰上待測。

2. 細菌、真菌：按照細胞數量（104 個）：提取液體積（mL）為 500~1000：1 的比例（建議 500 萬細胞加入 1mL 提取液），冰浴超聲波破碎細胞（功率 300w，超聲 2 秒，間隔 3 秒，總時間 3min）；然后 10000g，4℃離心 10min，取上清置于冰上待測。

3. 血清（漿）樣品：直接測定。二、測定步驟：

1、 分光光度計預熱 30min 以上，調節波長至 500nm，蒸餾水調零。

2、 將 50μmol/mL 標準液用提取液稀釋為 2.5、1.25、0.625、0.3125、0.15625、0.078μmol/mL 的標準溶液備用。

3、 操作表：(在離心管或 96 孔板中依次加入下列試劑)

總膽固醇含量計算

一、標準曲線的繪制：

以各個標準溶液的濃度為 x 軸，其對應的△A 標準為 y 軸，繪制標準曲線，得到標準方程 y=kx+b， 將△A 帶入方程得到 x（μmol/mL）

二、總膽固醇含量的計算：

1. 血清（漿）中 FC 含量計算： TC 含量（μmol/dL）=x×100。

2. 組織中 FC 含量計算：

1. 按樣本蛋白濃度計算

TC 含量（μmol/mg prot）=x×V 提取÷（Cpr×V 提取）=x÷Cpr。

2. 按樣本鮮重計算

TC 含量（μmol/g 鮮重）=x×V 提取÷W= x÷W

3. 細胞、細菌中 TC 含量計算：

TC 含量(μmol/104 cell)=x×V 提取÷500=0.002x。

100：1dL=100mL；V 提取：加入樣本的提取液體積，1mL；W：樣本質量，g；500:500 萬個細胞數量。

上海語純生物科技有限公司，是由具有*生命科學、生物技術背景人員共同創辦的技術企業。公司專注于原代細胞、腫瘤細胞及細胞培養相關試劑產品，為高校、食品、醫藥、生物研究等領域提供相關技術支持和服務。

公司自成立以來通過不斷地科技創新，產品研發，已為客戶提供定制化細胞產品以及完整的細胞培養解決方案，通過積極地探索、研發、深化和豐富產品，目前基礎培養基產品種類多達200多種，細胞系300多種，原代細胞接近600種。我們始終以“發展科學技術，關愛公眾生命健康”為動力，通過技術創新，廣泛吸納高科技人才，不斷完善產品體系、豐富產品鏈，積極拓展市場，擴充應用領域，，建立了具有市場競爭力的“語純”品牌。

注意事項

1、為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套及口罩操作；

2、為保持本產品的優良使用效果，請務必按照建議的儲存條件進行保存；

3、本產品僅供科學研究或進一步生產使用，不可用于臨床診斷或治療。

總膽固醇（TC）含量檢測試劑盒