總大腸菌群成品試劑使用說明書

  方法：品紅亞硫酸鈉培養基濾膜法

  方法來源：GB/T5750-2006

  應用范圍：飲用水、出廠水、水源水、廢水、泳池水等

  測定步驟：

◆注意：為防止收到空氣、輔助實驗器皿、操作人員等環節帶入細菌污染，請在無菌環境下 操作并做好各環節的滅菌工作。

1 、將濾膜放入沸水中 煮沸滅菌 3 次，每次 15 分鐘。每次均需換 水。滅菌后備用。

2 、將試劑放入沸騰的水 中（鍋里放有鐵架），將 培養基煮至融化完全后， 取出備用。

3、在酒精燈上將無菌 培養皿取出。

4、待步驟 1 培養基冷卻 至 50℃左右，在酒精燈 上方，將培養基導入培 養皿中。

5 、立即將培養皿平放 于 臺面上 ，旋搖培養 皿 ，將培養基放至凝 固，備用。

6 、用點燃的酒精棉球 火焰將杯蓋、濾杯、濾 膜底座和鑷子滅菌。

7、用滅菌的鑷子夾取一 片步驟 1 的無菌濾膜， 夾住邊緣，平貼到濾膜 底座上。

8 、安裝好抽濾裝置，倒 入 100mL 混勻的水樣并 抽濾，水干后再抽 5 秒即 可停止。

9 、取下濾杯，用滅菌 的鑷子取下濾膜

10、將濾膜平鋪于已經凝固的步驟 5  的培養基上，細菌截留面朝上，避免 出現氣泡。翻轉培養皿，置于 37℃ 恒溫培養箱內培養 24 小時±2 小時， 記錄有金屬光澤或深紅色菌

提示：若特征菌落數過多，則將水樣稀釋適當倍數，經過稀釋的水樣，最終結果需乘以 稀釋倍數。水樣稀釋、過濾及接種操作均為無菌操作。

  提示：若需做一平行樣，只需將平行的濾膜鋪于同一塊培養皿中即可實現。

  提示：為避免出現假陽性或者假陰性菌落可進一步進行革蘭氏染色、鏡檢和乳糖蛋白胨 再培養。