（1）單抗包被-抗原-酶標二抗-底物顯色。
ELISA試劑盒本法首先也是用特異性抗體包被于固相載體，經洗滌后加入含有抗原之待測樣品，如待檢樣品中有相應抗原存在，即可與包被于固相載體上的特異性抗體結合，經保溫孵育洗滌后，即可加入酶標記特異性抗體，再經孵育洗滌后，加底物顯色進行測定，底物降解的量即為欲測抗原的量。
（2）單抗包被-抗原-二抗-酶標二抗-底物顯色。（改良雙抗體夾心法）
本法首先是將特異性抗體a包被于固相載體，經洗滌加入含有欲測抗原之待檢樣品。
ELISA試劑盒 經孵育洗滌后再加一次未標記的特異性抗體b，
而這次加入的抗體b于*次包被于固相載體上的特異性抗體a對被測抗原來說都是特異性的，
但不是用同種動物免疫制備的，否則可出現非特異性反應。
經孵育洗滌后，再加酶標記抗b抗體，再經孵育洗滌后加底物顯色進行測定。
這種方法與雙抗體夾心法不同之處是多加了一層抗體。
因此，放大的倍數更高，故比雙抗體夾心法更加靈敏。
ELISA試劑盒 同時避免標記特異性抗體，而另一優點是只要標記一種抗抗體，即可達到多種應用。