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豬肉和牛肉組織中頭孢菌素類抗生素的固相萃取凈化方法

閱讀:4798        發(fā)布時間:2010-5-27

 

豬肉和牛肉組織中頭孢菌素類抗生素的固相萃取凈化方法
1. 萃取
a. 10g肌肉樣品中加入40mL醋酸銨緩沖液(pH5.0,0.05mol/L),勻漿;
b. 加入10mL異辛烷,用漩渦混合器混合均勻;
c. 2400r/min離心10min;
d. 將上清液轉移到玻璃試管中。
2. SPE凈化
a. 活化:分別用5mL甲醇,5mL超純水以及5mL醋酸銨緩沖液(pH5.0,0.05mol/L)分別淋洗C18吸附劑柱床;
b. 上樣:將玻璃試管中萃取后的上清液傾倒入SPE中;
c. 淋洗:用2mL的醋酸銨緩沖液(pH5.0,0.05mol/L),1mL的超純水和1mL的去離子水/乙腈( 90:10,V/V) 分別淋洗柱床,去除干擾雜質;
d. 干燥:柱管通空氣,抽氣5min;
e. 洗脫:加2mL去離子水/乙腈(90:10,V/V)洗脫液,進行洗脫,流速控制在3mL/min,收集洗脫液;
f . 氮吹干燥:50℃ 條件下,氮氣吹掃,蒸發(fā)至大約4μL左右;
g. 定容:用醋酸銨緩沖液(pH7.0,0.025mol/L)和0.1M的NaOH調節(jié)到pH7.0,并定容至1.6mL。
3. LC-UV檢測
4. 樣品成分
頭孢喹諾
頭孢氨芐
頭孢匹林及其代謝物Desacetylcephapirin
頭孢噻呋及其代謝物Desfuroylceftiofur
本方法中使用的SPE柱:
Bond Elut C18( 500mg, 6mL, PN.12102052 )。
 

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