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什么是標準特殊的蛋白分子量
最近更新時間：2011-3-15
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什么是標準特殊的蛋白分子量
特殊的分子量標準一般而言就是修飾標記蛋白分子量標準嗎通常來將，它們都是western blot的蛋白分子量標準
生物素標記蛋白標準
未染色的Marker在做Western時，需要在印跡前先用麗春紅或者是SYPRO熒光蛋白染色液等不干擾Western Blot的染色方法顯色，在膠上做標記zui后才能“拼”在zui后的結果中，如果是預染的Marker就要在轉膜后標記膜，或者剪膜，zui后在“拼上”。要是想直接將Marker結果顯示在zui后結果上，不用手工作圖或者拼接，那就要Western的Marker了。比如生物素標記的蛋白標準。這種方法主要是配合化學發光法：在蛋白分子量上標記生物素，通過帶有抗生物素的抗體或者偶聯鏈親霉素的抗體，在化學發光檢測到目的蛋白帶時就可以同時看到相應的分子量標準一起發光顯影了。不同于普通蛋白分子量標準的便宜、預染蛋白分子量的方便，這一方法的優點是與Marker和目的蛋白對應性好，同時在同張片上顯示，不用拼接，利于分析。缺點是如果樣品中帶有生物素背景，那個抗生物素抗體有可能影響結果，而且反應體系太過復雜也會干擾實驗結果。
特殊標記蛋白標準
在經過修飾的蛋白標準中，除了生物素標記以外，近些年由于下游蛋白操作的豐富化與復雜化，也出現帶有“尾巴”的蛋白標準。比如His-Tag，如果每個Marker條帶都有His –tag，那二抗添加His-Taq抗體很容易將Marker條帶顯示在Western結果上。很方便，問題就是有可能有潛在的干擾，比如樣品中正好有類似Histag的結構。不過這可以通過對照檢測的。這些經過特殊標記的蛋白Marker一般都不會影響目的蛋白的正常顯色，而且和目的蛋白顯色在同一張膜上，有時還可以作為陽性對照，但是各自的檢測顯色機制和效果又有一些區別。