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PCR儀的使用步驟及原理

時間:2022/10/11閱讀:4325
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PCR儀是為滿足當(dāng)今分子生物實驗室的需求所設(shè)計。高品質(zhì)的光學(xué)器件、可靠的溫度控制系統(tǒng)及嚴(yán)格的生產(chǎn)工藝確保儀器可靠性、精度和準(zhǔn)確度。PCR儀主要功能包括多通道 PCR 檢測,熔解曲線及數(shù)據(jù)分析管理等。儀器可以使用條形管或單個 PCR 管進行 PCR 反應(yīng)。

PCR儀的操作步驟:

1、準(zhǔn)備好樣品,分別分裝于200微升的離心管里;

2、接通PCR儀的電源,打開PCR儀的開關(guān),使儀器初始化;

3、打開儀器的加熱板,放入需要進行反應(yīng)的樣品;

4、從儀器主頁面中選擇自己的使用文件夾;

5、選擇合適的運行程序,點擊開始按鈕;

6、根據(jù)實際離心管里的裝樣量設(shè)置相應(yīng)的體積參數(shù)(50-100微升);

7、再次確認(rèn),點擊開始,程序就開始運行了。等待程序運行結(jié)束,取樣即可!

PCR儀的原理是:PCR擴增時在加入一對引物的同時加入一個特異性的熒光探針,該探針兩端分別標(biāo)記一個報告熒光基團和一個淬滅熒光基團。開始時,探針完整地結(jié)合在DNA任意一條單鏈上,報告基團發(fā)射的熒光信號被淬滅基團吸收,檢測不到熒光信號;PCR擴增時,Taq酶將探針酶切降解,使報告熒光基團和淬滅熒光基團分離,從而熒光監(jiān)測系統(tǒng)可接收到熒光信號,即每擴增一條DNA鏈,就有一個熒光分子形成,實現(xiàn)了熒光信號的累積與PCR產(chǎn)物形成*同步。


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