Prokazyme生產(chǎn)和銷售用于研究，診斷和工業(yè)測試目的的新型酶。該公司成立于2006年，是冰島生物技術(shù)公司Prokaria的副產(chǎn)品，該公司后來合并為非營利性國有企業(yè)Matis。Prokazyme基于二十年的地熱生物勘探，微生物基因組學和酶發(fā)現(xiàn)。Prokazyme（作為中小企業(yè)）與馬蒂斯組成了一個研究聯(lián)盟，并共同參與了由歐盟資助的一些研究項目。持續(xù)的研發(fā)和與Matis的戰(zhàn)略聯(lián)盟使Prokazyme有機會開發(fā)大量不斷增長的嗜熱細菌和病毒基因數(shù)據(jù)庫，并繼續(xù)開發(fā)新的*酶產(chǎn)品。

Glucansucrase (Alpha-glucanotransferase) from Lactobacillus reuteri

A moderately thermostable Glucansucrase (4,6-Alpha-Glucanotransferase, reuteransucrase) from Lactobacillus reuteri strain 121

中度熱穩(wěn)定的葡聚糖蔗糖酶（4,6-α-葡聚糖轉(zhuǎn)移酶，reuteransucrase）。該酶從蔗糖轉(zhuǎn)移葡萄糖單元以制備具有α（1→4）糖苷鍵的高度支化的高分子量α-D-葡聚糖以及一些α（1→6）連接的葡糖基單元。

該酶可購買100或500微升溶液（1毫克/毫升）。

產(chǎn)品Gtfa163S | 100微升| 195歐元

產(chǎn)品Gtfa163L | 500微升| 490歐元

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酶活性：Gtfa163  葡聚糖蔗糖酶 （Reuteransucrase） 催化葡萄糖從蔗糖轉(zhuǎn)移，形成高度支化的高分子量α-D-葡聚糖，具有α（1→4）糖苷鍵，但也有一些α（1→6） -在分支點處連接的葡糖基單元和4,6-二取代的葡糖基單元。

例如，在pH4.7的含有1mM CaCl 2和100mM蔗糖的25mM乙酸鈉緩沖液中，在50℃下測定葡萄糖轉(zhuǎn)移酶活性60小時。這使得蔗糖*利用，約75％進入α-D-葡聚糖。 

活性測定：  葡聚糖蔗糖酶活性在50℃下在pH4.7的25mM乙酸鈉緩沖液中測定，含有10mM CaCl 2和30nM酶。

單位定義：  酶活性的一個單位（U）是導致每分鐘從蔗糖中釋放1μmol果糖的量。

同義詞： glycoside hydrolase，glucosyltransferase，4,6-alpha-Glucanotransferase，Reuteransucrase

蛋白質(zhì)家族： Glycosyl hydrolase family 70（GH70  ） - GH-H clan - CAZy數(shù)據(jù)庫GH70家族

酶分類：EC  2.4.1.-

來源：乳酸菌羅伊氏乳桿菌菌株121

蛋白質(zhì)序列： NBCI蛋白質(zhì)進入

結(jié)構(gòu)信息：  來自羅伊氏乳桿菌 121  的Gtfa163 葡聚糖蔗糖酶（Reuteransucrase）的晶體結(jié)構(gòu)  已經(jīng)確定并顯示在圖1中（Pijning等人，2012）。- PDB條目4AMC 

圖1：Gtfa163  葡聚糖蔗糖酶的晶體結(jié)構(gòu)

（包含殘基745-1763的截短形式，包括催化結(jié)構(gòu)域）  

應用：

胞外多糖合成：

該酶產(chǎn)生具有復合結(jié)構(gòu)的α-D-葡聚糖聚合物（MW 3.5×10 6 Da），其包括所有鑒定的結(jié)構(gòu)元素，如下面的圖2所示 （van Leeuwen 等人 2008）

圖2. 由Gtfa163葡聚糖蔗糖酶制備的α-D-葡聚糖產(chǎn)物的復合模型 

來自蔗糖的低聚糖：

僅存在蔗糖，并且在分支開始之前，酶活性將通過交替的α（1→4）和α（1→6）鍵產(chǎn)生線性寡糖。不存在蔗糖的麥芽低聚糖（DP2-DP6）是慢速底物。對于高濃度的蔗糖，低分子量低聚糖的形成優(yōu)于高分子量多糖。

Gtfa163葡聚糖蔗糖酶的特性：

?F igure 3.  溫度宜：所述酶具有宜活性在50℃附近（Kralj等人，2004）。

圖4.  pH曲線： 實線，轉(zhuǎn)移酶活性; 虛線，水解活性  （Kralj等，2004）。

參考文獻：

Van Leeuwen SS，Kralj S，van Geel-Schutten IH，Gerwig GJ，Dijkhuizen L，Kamerling JP（2008）由羅伊氏乳桿菌菌株35-5葡聚糖蔗糖酶GTFA酶產(chǎn)生的α-D-葡聚糖（EPS35-5）的結(jié)構(gòu)分析。Carbohydr。Res。343：1251-1265。

Kralj S，van Geel-Schutten GH，van der Maarel MJEC＆Dijkhuizen L（2004）Lactobacillus reuteri 121 reuteransucrase的Biochemical and molecular characterization。微生物學 150：2099-2112。

Leemhuis H，Pijning T，Dobruchowska JM，van Leeuwen SS，Kralj S，Dijkstra BW，Dijkhuizen L.（2013）Glucansucrases：三維結(jié)構(gòu)，反應，機制，α-葡聚糖分析及其在生物技術(shù)和食品應用中的意義。J. Biotechnol。163：250-272。

Pijning T，Vujicic-Zagar A，Kralj S，Dijkhuizen L＆Dijkstra BW（2012）來自羅伊氏乳桿菌 121 的α-1,6 /α-1,4-特異性葡聚糖蔗糖酶GTFA的結(jié)構(gòu).Acta Cryst。F68：1448-1454。

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