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Hoechst33258染色試劑盒

細胞凋亡熒光Hoechst 33258檢測試劑盒

（Apoptotic Cell Hoechst 33258 Detection Kit）

Store at4℃ for one year

Expire date：

一、試劑盒說明

細胞凋亡時產生zui顯著的變化是染色體固縮，DNA裂解使細胞核形態產發生變化。本試劑盒提供的熒光染料Hoechst 33258是一種無毒、水溶性雙苯咪唑類化合物，可作為熒光探針與DNA分子結合。在凋亡細胞中，細胞膜對Hoechst 33258的攝取增高，并且由于染色體高度濃縮，Hoechst 33258與之結合增強，染色呈強藍色熒光，而正常細胞只呈微弱熒光，死細胞則不被染色，由此可檢測出凋亡。

二、試劑盒組份

組份	KGA211（100 assays）	儲存條件
Hoechst 33258	1.0 mL	4℃，避光
Buffer A	25 mL	4℃

注: Hoechst 33258工作液的配制：使用前，取試驗盒中Hoechst 33258原液用蒸餾水稀釋10倍。

三、試劑盒以外自備儀器和試劑

熒光顯微鏡、低速離心機、微量移液器、1.5m L Microtube、載玻片、蓋玻片、4%甲醛溶液

四、使用注意事項

1．染色時間嚴格控制，染色過久可導致假陽性。

2．由于不同細胞對Hoechst 33258的攝取能力不同，該法不一定適用所有細胞。

五、操作方法

1. 用適當的方法誘導細胞凋亡；

2. 用冷Buffer A洗滌細胞二次，離心收集 10⁶細胞于1.5mL微量離心管中；

（貼壁細胞原位固定染色）

3. 加入1mL 的4%甲醛溶液（用戶自備），4℃固定細胞10min；

4. 離心去固定液，用Buffer A洗兩遍；離心后留50～100μL Buffer A重懸細胞；

5. 取上步驟50～100μL細胞懸液涂片，自然晾干；

6. 滴加100μL Hoechst 33258工作液（備注1），室溫染色10 min，水沖凈晾干；

7. 以紫外光340nm波長激發，熒光顯微鏡下觀察。

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