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EB染色試劑盒
  • EB染色試劑盒
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貨物所在地:江蘇南京市

更新時間:2025-06-24 21:00:07

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EB染色試劑盒

 細胞凋亡溴化乙啶(EB)染色試劑盒
(Cell Apoptosis Ethidium Bromide Detection Kit)
 Store at 4 for one year
Expire date

一、試劑盒說明
溴化乙啶(Ethidium Bromide  EB是一種DNA結合性熒光色素,其激發(fā)波長510nm。發(fā)射波長595 nm。產生桔紅色熒光。EB不具有膜通透性,不能透過活細胞膜,只能染死細胞,因此用EB單染時,正常細胞不著色,早期凋亡細胞呈微弱桔紅光,晚期凋亡細胞桔紅色熒光增強。而死細胞呈強桔紅光。而EB常與吖啶橙合用雙染進行凋亡檢測,與吖啶橙雙染時,正常細胞中EB不能透膜著色,而吖啶橙可透過細胞膜,使細胞色均勻熒光,細胞圓形均勻;而在凋亡細胞中,細胞皺縮、染色質凝聚、固縮或斷裂,出芽,凋亡小體形成。染上致密濃染的黃色熒光,或黃綠色顆粒;而壞死細胞被EB染成桔紅色,由此熒光顏色和細胞形態(tài)可區(qū)分出正常細胞、凋亡細胞及壞死細胞。
二、試劑盒組份
組分
KGA216100 assays
儲存條件
溴化乙啶 EB染液
500μL
4℃,避光
10×Buffer A
10 mL
4℃
: 1×Buffer A配制:用前用雙蒸水將10×Buffer A稀釋10倍。
三、試劑盒以外自備儀器和試劑
熒光顯微鏡、低速離心機、微量移液器、1.5m L Microtube、載玻片、蓋玻片、
四、使用注意事項
EB染液有毒,操作時要戴手套,需避光。
五、操作方法
  1. EB單染
     (1)收集細胞,1×Buffer A洗一次,加適量的1×Buffer A重懸,調整細胞濃度約為106/mL;
     (2)吸取95μL細胞懸液和5μLEB染液,輕輕混勻;
(3)室溫避光染色15min后,滴加于載玻片上,加蓋玻片;
(4)熒光顯微鏡,濾光片515nm觀察,計數(shù)、拍照
正常細胞——細胞不被染色;壞死細胞——細胞具桔紅色熒光;
   2. 吖啶橙AO雙染
     (1)收集細胞,1×Buffer A洗一次,加適量的1×Buffer A重懸,調節(jié)細胞濃度約為106/mL;
     (2)吸取90μL細胞懸液,加入EB染液和吖啶橙染液各5μL輕輕混勻;
(3)室溫避光染色15min后,滴加于載玻片上,加蓋玻片;
(4)熒光顯微鏡,濾光片515nm觀察,計數(shù)、拍照
正常細胞——細胞均勻染成綠色熒光;
壞死細胞——細胞桔黃色熒光;
凋亡細胞——染色質濃縮,細胞核碎裂,被染成大小不一、致密濃染的黃綠色顆粒或見胞質芽狀突起。
     (5)計算細胞凋亡率和死亡率

  

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