葡聚糖凝膠色譜柱選購(gòu)指南

時(shí)間：2012/10/18閱讀：953

葡聚糖凝膠色譜柱選擇條件：
梯度洗脫在Sephadex使用中并不象在正相柱層析中那么重要。首先你的樣品須要能溶解在盡量少量的洗脫劑中。極性在的用甲醇水系統(tǒng);極性小者一般用不含水的系統(tǒng)。我們實(shí)驗(yàn)室常用正己烷二氯甲烷甲醇系統(tǒng)，用了很多年，效果較好。

（2）飽和層析柱：

用洗脫劑將凝膠搖勻，直立柱身，讓其自然沉降，此時(shí)要防止氣泡留在其中。至少半小時(shí)打開(kāi)開(kāi)關(guān)，流出幾個(gè)柱體種的洗脫劑，目的是使其膨脹在正確比例的洗脫劑中。

（3）樣品處理：用盡量少的洗脫劑溶解樣品，常壓過(guò)濾。

（4）濕法上柱。這也是要有技巧的步驟。

（5）洗脫：控制流速，一般1drop/s以下，可參見(jiàn)廠家的一些參數(shù);必要時(shí)更改極性（很多時(shí)一個(gè)極性就可以將樣品洗脫完畢）。

再生以備下次使用。

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