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ELISA試劑盒洗滌方式大PK

閱讀:88          發布時間:2016-10-9

人ELSIA試劑盒就是靠洗滌來達到分離游離的和結合的酶標記物的目的。通過洗滌以清除殘留在板孔中沒能與固相抗原或抗體結合的物質,以及在反應過程中非特異性地吸附于固相載 體的干擾物質。聚苯乙烯等塑料對蛋白質的吸附是普遍性的,而在洗滌時又應把這種非特異性吸附的干擾物質洗滌下來。
洗滌的方式除某些ELISA儀器配有特殊的自動洗滌儀外,手工操作有浸泡式和流水沖洗式兩種,過程如下:
(1)浸泡式
a.吸干或甩干孔內反應液;
b.用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去);
c.浸泡,即將洗滌液注滿板孔,放置1-2分鐘,間歇搖動,浸泡時間不可隨意縮短;
d.吸干孔內液體。吸干應*,可用水泵或真空泵抽吸,也可甩去液體后在清潔毛巾或吸水紙上拍干;
e.重復操作c和d,洗滌3-4次(或按說明規定)。在間接法中如本底較高,可增加洗滌次數或延長浸泡時間。人ELSIA試劑盒
微量滴定板多采用浸泡式洗滌法。洗滌液多為含非離子型洗滌劑的中性緩沖液。聚苯乙烯載體與蛋白質的結合是疏水性的,非離子型洗滌劑既含疏水基團,也含親 水基團,其疏水基團與蛋白質的疏水基團借疏水鍵結合,從而削弱蛋白質與固相載體的結合,并借助于親水基團和水分子的結合作用,使蛋白質回復到水溶液狀態, 從而脫離固相載體。洗滌液中的非離子型洗滌劑一般是吐溫20,其濃度可在0.05%-0.2%之間,高于0.2%時,可使包被在固相上的抗原或抗體解吸附而減低試驗的靈敏度。
(2)流水沖洗式
流水沖洗法zui初用于小珠載體的洗滌,洗滌液僅為蒸餾水甚至可用自來水。洗滌時附接一特殊裝置,使小珠在流水沖擊下不斷地滾動淋洗,持續沖洗2分鐘后,吸干液體,再用蒸餾水浸泡2分鐘,吸干即可。浸泡式猶如盆浴,流水沖洗式則好比淋浴,其洗滌效果更為*,且也簡便、快速。已有實驗表明,流水沖洗式同樣也適用于微量滴定板的洗滌。洗滌時設法加大水流量或加大水壓,讓水流沖擊板孔表面,洗滌效果更佳。
phospho-Rb     磷酸化視網膜母細胞瘤相關蛋白1抗體
Phospho-Rb     磷酸化視網膜母細胞瘤相關蛋白1抗體
RGS4    精神分裂癥相關蛋白9抗體
RPRD1A    細胞周期依賴性激酶抑制相關蛋白抗體
RBM38    RNA結合蛋白38抗體
Relaxin 1    松弛肽/松弛素抗體
Renalase    腎胺酶抗體
RNF20    環指蛋白20抗體
RanBP1    RAN結合蛋白1抗體
RAE1    mRNA結合蛋白抗體
RNF126    環指蛋白126抗體
RBC    小鼠抗人紅細胞單克隆抗體
TIG2    視黃酸受體應答蛋白2抗體
RAP1A    抗Rap1A抗體
RAB7    RAS癌基因相關蛋白RAB7抗體
人ELSIA試劑盒

 

 

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