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玉米赤霉烯酮免疫親和柱的樣本處理步驟分析

閱讀：875 發(fā)布時(shí)間：2023-3-5

　　玉米赤霉烯酮免疫親和柱是玉米赤霉菌的代謝產(chǎn)物，具有類雌激素樣作用，具有較強(qiáng)的生殖毒性和致畸作用，可引起動(dòng)物發(fā)生雌激素亢進(jìn)癥，導(dǎo)致動(dòng)物不孕或流產(chǎn)，對(duì)家禽、豬、牛和羊的影響較大，給畜牧業(yè)帶來很大的經(jīng)濟(jì)損失。

　　玉米赤霉烯酮免疫親和柱的樣本處理步驟：

　　花生，玉米，大米，小麥及其制品和飼料

　　1、稱取50g粉碎的樣品于100mL容量瓶中，加入5.0g氯化鈉，以樣品提取液定容；

　　2、轉(zhuǎn)移至均質(zhì)杯中，在均質(zhì)器上高速攪拌，提取2分鐘；

　　3、4000r/min離心5min或用定量濾紙過濾

　　4、取10mL濾液并加入40mLPBS緩沖液稀釋，用玻璃微纖維濾紙過濾，取過濾后液體待測(cè)；

　　5、將免疫親和柱連接于10.0mL玻璃注射器下。準(zhǔn)確移取10.0mL樣品提取液注入玻璃注射器；

　　6、將空氣壓力泵與玻璃注射器連接，調(diào)節(jié)壓力使溶液以約1滴/S的流速緩慢通過免疫親和柱，直至2~3mL空氣通過柱體；

　　7、以10.0mL的PBS溶液和去離子水依次淋洗柱子1次，流速約為1滴-2滴/S，棄去全部流出液，并使2mL~3mL空氣通過柱體；

　　8、準(zhǔn)確加入1.0mL色譜級(jí)甲醇洗脫，流速為1滴/S，收集全部洗脫液于玻璃試管中，供檢測(cè)用。

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