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水中揮發酚的測定采用4-氨基安替比林分光光度法，實驗原理、適用范圍、所需試劑、干擾消除及結果計算等參照國標HJ503-2009。

一、操作步驟

1、樣品加熱蒸餾，待餾出液接近250ml時，停止加熱，用蒸餾水定容至250ml。

2、將250ml餾出液依次全部轉移至本公司萃取儀500ml萃取瓶中。

3、在各個水樣萃取瓶中依次手動加入2.0ml緩沖溶液，混勻溶液。

4、依次手動加入1.5ml的4-氨基安替比林溶液，混勻溶液。

5、依次手動再加入1.5ml鐵KCN，使得試劑與水樣混勻，再靜置10min。

6、萃取瓶中儀器自動或手動依次加入10mlCHCl?，選擇執行文件1-6中的放上水樣的相對應的按鍵并點擊開始萃取，儀器開始同時萃取水樣，萃取時間為2分鐘 。萃取完后，靜置分層。

7、用干脫脂棉或濾紙拭干分液活塞頸管內壁，于頸管內塞一小團干脫脂棉或濾紙，并插入到萃取瓶將CHCl?層通過干脫脂棉團或濾紙，棄去最初濾出的數滴萃取液后，將余下CHCl?直接放入到比色皿中。

8、于460nm波長，30mm比色皿以CHCl?為參比，測定吸光度。

9、空白實驗：蒸餾水代替試樣，按4-10步驟測定其吸光度。空白與試樣測定。

二、注意事項

1、緩沖溶液為氨水配置，所以在混勻時萃取強度不宜過高，在適宜強度下要保證充分混合均勻，否則會造成空白偏大。

2、氯仿萃取時分層效果很關鍵，得確保萃取充分且分層清晰，不然會影響揮發酚的測定結果。

3、放液時要成滴，不能成線。