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技術(shù)文章

操作因素可致elisa結(jié)果差異

閱讀:2362          發(fā)布時間:2013-3-13

操作因素可致elisa結(jié)果差異

一、操作因素對ELISA結(jié)果的影響
ELISA操作步驟復(fù)雜,操作不當將引起較大的誤差。以下敘述各個步驟中的影響因素。
1.加樣
2.溫育
3.洗滌
4.顯色
5.比色
二、灰區(qū)的設(shè)置
通常情況下,ELISA定性實驗以“陽性”和“陰性”來報告結(jié)果,兩者間有一條分界線被稱為“陽性判斷值”(cut-off value,CO值),這是定性免疫測定結(jié)果報告的依據(jù)。
三、標本復(fù)查
ELISA手工檢測過程復(fù)雜,影響因素較多,即使室內(nèi)質(zhì)控在控,也可能因孔間差異而造成結(jié)果的差異,因此加大復(fù)查力度是保證結(jié)果準確性的可靠方法,比如對HBsAg、HBeAg、HCV-Ab、HIV-Ab、TP-Ab等項目的可疑、弱陽性標本及少見模式的檢測結(jié)果進行復(fù)查。
四、結(jié)果判斷
常用下列幾種方法表示結(jié)果:
1.定性測定
2.半定量測定 結(jié)果一般以滴度表示。
3.定量測定 即用已知量的標準品作一系列稀釋后進行ELISA測定,繪制標準曲線,結(jié)果以量或單位表示。在ELISA定量檢測中每一塊反應(yīng)板都必須繪制相應(yīng)的標準曲線。

 不同批次的ELISA試劑在制作過程中很難保證質(zhì)量*一致,即使是通過批批檢的項目其檢測結(jié)果也存在差異,因此必須選擇和訂購長批號的試劑,并保證保存條件。嚴格執(zhí)行這一標準可以避免因試劑批號改變而重新建立質(zhì)控體系及重新評估試劑的復(fù)雜過程,并且能夠保證結(jié)果的穩(wěn)定性;對于效期短、使用率低的試劑,應(yīng)當小量分裝,每次使用則取分裝部分即可,避免反復(fù)凍融造成試劑的失效。
 標本干擾因素包括內(nèi)源性干擾因素和外源性干擾因素,前者包括類風(fēng)濕因子、補體、異嗜性抗體、自身抗體、溶菌酶等,后者包括標本溶血、標本被細菌污染、標本貯存時間過長、標本凝固不全、冷凍標本的反復(fù)凍融等。

本公司提供各種種屬各種系列ELISA檢測試劑盒,主要用于科研方面,不用于臨床診斷。可以用于檢測各種指標。
主要分為以下系列:
1.細胞因子檢測試劑盒
2.內(nèi)分泌檢測試劑盒
3.肝纖維化檢測試劑盒
4.心肌梗塞檢測試劑盒
5.腫瘤標志物檢測試劑盒
6.自身免疫檢測試劑盒
7.優(yōu)生優(yōu)育檢測試劑盒
8.傳染病檢測試劑盒等等。 
上海滬鼎生物有限公司提供ELISA試劑盒實驗代測服務(wù),詳情請具體產(chǎn)品信息!

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