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操作過程中的問題造成假陽性
閱讀：1664 發布時間：2013-9-24操作過程中的問題造成假陽性
在常見的elisa檢測實驗中，有很多的過程都會導致實驗失敗，一點小小的誤差也不能盡人意，所有操作過程中一定要注意這些方面，保證實驗成功。
3、1加樣
對于間接ELISA標本一般都要進行稀釋，如果加樣不準就會造成誤差，尤其當稀釋倍數大時，很小的誤差，會導致較大的相對誤差，使陰性（或弱陽性）標本呈陽性（或陰性）。加樣時應將所加物加在ELISA板孔的底部，避免加在孔壁上部，并注意不可濺出，不可產生氣泡。目前，大部分血站都已使用全自動酶免加樣系統處理標本，可較好地避免以上誤差。
3、2洗滌
在ELISA中正確的洗滌是保證得到可重復結果的關健一步，應引起操作者重視。無論是手工操作還是機器操作，得出不正確的結果常與不正確的洗滌有關，ELISA就是靠洗滌來達到分離游離和結合的酶標記物的目的。通過洗滌以消除殘留在板孔中沒能與固體抗原或抗體結合的物質，以及在反應過程中非特異性吸附于固相載體的干擾物質。
3、3 溫育
每種試劑都有其*反應模式，其中溫度和溫育時間控制是重要因素。因孵育溫度高，反應時間長，會造成整板本底高，陽性率高。溫育一般用濕盒或水浴，反應板不宜疊放，以保證各板溫度都能迅速平衡，為避免蒸發，板上應加蓋。
3、4酶標儀判讀
作為記錄測定結果的儀器，酶標儀的性能穩定與否，決定結果的可靠度。首先酶標儀應定期進行保養，對濾光片要定期校正；其次酶標儀波長設置要正確，使用雙波長，一個檢測波長，一個參比波長，以消除微孔板底部劃痕、不平、指印或液面高度差異造成的光干擾。此外，在用酶標儀讀數時先擦試微孔板底部并壓平板條。由于各種酶標儀性能有所不同。
以上四種方法都有可能在elisa試劑盒檢測上令結果不一樣，從而導致實驗失敗，我司技術在經過多次實驗中得出以上結論，所以elisa試劑盒實驗能否成功取決于多方面的因素，我司所售elisa試劑盒均可保證質量，提供免費技術指導及實驗代測服務，為您節省時間，提高實驗成功度，咨詢關于elisa試劑盒的任何問題。我們恭候您的光臨。