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甜菜堿 Betaine ——高性能的PCR增強劑

2017-5-2  閱讀(1057)

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    為提高含高GC含量或連續多個A/T的復雜基因的PCR擴增效率及擴增特異性,科研人員通常會嘗試在PCR反應體系中添加增效劑。翊圣生物現為廣大科研人員提供質量高、適用性廣的兩種PCR增效劑:甜菜堿與海藻糖。

 

甜菜堿

 

    甜菜堿是一種從甜菜中發現的生物堿,是膽堿氧化代謝的終產物,參與甲硫氨酸(蛋氨酸)生物合成路徑,是非常重要的滲透調節物質。翊圣生物提供的甜菜堿有兩類,鹽酸甜菜堿和甜菜堿水合物,后者分子式為C5H11NO2 H2O是分子生物學級別,純度(TLC)≥99%,可用于分子生物學實驗

 

產品介紹

 

    翊圣生物是在工具酶及其反應輔助試劑方面經驗,確保*高品質甜菜堿,并大量現貨,可保證批次間產品的穩定性。該產品可作為原料用于PCRRT-PCRqPCR等實驗反應優化的添加劑成分,大大改善擴增效率和擴增特異性、改善逆轉錄效率等。

 

甜菜堿特點

 

1. 甜菜堿可幫助DNA聚合酶順利通過DNA某些復雜二級結構,防止DNA聚合酶的從模板DNA中解離。

DNA局部區域因含有多個復雜堿基(Py-G-C),會促使DNA聚合酶的停滯,zui終導致DNA聚合酶停止有效延伸。而甜菜堿可提高DNA小溝中富含鳥嘌呤和胞嘧啶區域的鳥嘌呤和胞嘧啶的水合作用,影響DNA分子結構,改變DNA靈活性,幫助DNA聚合酶沿著DNA模板延伸[1]

2. 甜菜堿可消除變性溫度對堿基的依賴性。濃度依賴性降低高GC含量序列的Tm,并使PCR兩引物的Tm相接近,zui終降低DNA Tm[2]

3. 高濃度的甜菜堿溶液可穩定DNA-蛋白復合物。

4. 在逆轉錄溫度條件下,甜菜堿可減少RNA二級結構的形成。在甜菜堿和海藻糖聯合用于逆轉錄實驗時,甜菜堿減少RNA分子內復雜二級結構的形成,降低RNA溶解溫度;海藻糖穩定逆轉錄酶,保持逆轉錄酶活性。通過二者聯合,確保更長cDNA的合成長度[3]

 

主要應用

 

1. 可應用于DNA的測序反應實驗中,提升含有重復序列(連續多個AT)的測序性。

2. 提升長片段DNAPCR成功率。

3. 適用于復雜模板的PCR擴增,如高GC含量DNAPCR擴增。

4. 適用于某些粗糙模板的直接測序,如經NaOH溶液裂解的細胞裂解物。

5. 適用于較長cDNA的逆轉錄反應。

6. 作為LAMP環介導等溫擴增的添加劑。

 

甜菜堿參數

 

中文別名(Chinese Synonym

甜菜堿一水合物,一水甜菜堿,*基甘氨酸一水合物

英文別名(English Synonym

Betaine monohydrate;(Carboxymethyl) trimethylammonium hydroxide monohydrate

CAS號(CAS NO.

590-47-6

分子式(Formula

C5H11NO2 H2O

分子量(Molecular Weight

135.16g/mol

外觀(Appearance

晶體粉末

純度(Purity

99%

溶解性(Solubility

溶于水,可配置成10%水溶液

結構式(Structure

 

溶液配制

 

溶于水。濃度為10%水溶液,質量體積比。溶液無色透明。

 

參考文獻

 

[1]. Myka DS,Chamberlin MJ. Analysis and suppression of DNA polymerase pauses associated with a trinucleotide consensus. Nucleic Acids Res.1996 Jul 15;24(14):2774-81.

[2]. Rees WA,Yager TD,Korte J,von Hippel PH. Betaine can eliminate the base pair composition dependence of DNA melting. Biochemistry.1993 Jan 12;32(1):137-44.

[3]. Spiess AN,Ivell R. A highly efficient method for long-chain cDNA synthesis using trehalose and betaine. Anal Biochem.2002 Feb 15;301(2):168-74.

 

 

 

訂購信息

 

產品貨號

產品名稱

規格

價格(元)

60391ES60

Betaine 甜菜堿(分子生物學級別)

100g

286.00

60391ES76

Betaine 甜菜堿(分子生物學級別)

500g

956.00

 

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