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翌圣生物科技（上海）股份有限公司
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產品簡介
| 供貨周期 | 現貨 | 規格 | 100 T |
|---|---|---|---|
| 貨號 | 13110ES60 | 應用領域 | 生物產業 |
產品介紹
產品信息
產品名稱 | 產品編號 | 規格 | 價格（元） | *（元） |
Hifair® V nCov Multiplex One Step RT-qPCR Probe Kit | 13110ES50 | 50 T | 1545.00 | 435.00 |
13110ES60 | 100 T | 2782.00 | 780.00 | |
13110ES80 | 1000 T | 21832.00 | 6800.00 | |
13110ES92 | 10000 T | 168882.00 | 60000.00 | |
13110ES93 | 10000 T | 168882.00 | 60000.00 |
產品描述
Hifair® V nCov Multiplex One Step RT-qPCR Probe Kit是以RNA為模板進行多重定量PCR反應的試劑盒。在實驗的過程中，逆轉錄和定量PCR在同一反應管中進行，簡化了實驗操作，降低了污染的風險。
本試劑盒利用耐熱Hifair® V Reverse Transcriptase高效合成第一鏈cDNA，并利用UNICON® HotStart Taq DNA Polymerase進行定量擴增。本試劑盒主要包含優化的MP Buffer，Enzymes Mix等，緩沖液中已含有Mg2+和dNTP等，并添加了有效抑制非特異性PCR擴增的因子和提升多重qPCR反應擴增效率的因子，能夠保證引物擴增效率的同時，進行多達四重的反應。
產品組分
組分編號 | 組分名稱 | 產品編號/規格 | ||
13110ES60 (100 T) | 13110ES80 (1000 T) | 13110ES92 (10000 T) | ||
13110-A | 2×Hifair® V MP Buffera,b | 1.2 mL | 12 mL | 120 mL |
13110-B | Hifair® V Enzyme Mixc | 100 μL | 1 mL | 5 mL×2 |
13110-C | RNase Free H2O | 1.2 mL | 12 mL | 120 mL |
【注】a) 2×Hifair® V MP Buffer為Multiplex One Step RT-qPCR Probe Buffer的簡寫。
b) 不含Rox reference dye。如需，推薦使用貨號10200ES產品。
c) Hifair® V Enzyme Mix主要包含有耐熱Hifair® V Reverse Transcriptase、RNase inhibitor和UNICON® HotStart Taq DNA Polymerase。
適用機型
ABI系列：ABI 5700, 7000, 7300, 7700, 7900HT Fast, StepOne, StepOne Plus; 7500, 7500 Fast, ViiA7, QuantStudio 3 and 5, QuantStudio 6, 7, 12k Flex;
Bio-Rad系列：Bio-Rad CFX96, CFX384, iCycler iQ, iQ5, MyiQ, MiniOpticon, Opticon, Opticon 2, Chromo4;
Roche系列：Roche Applied Science LightCycler 480, LightCycler 2.0; Lightcycler 96;
其他系列：Stratagene MX3000P, MX3005P, MX4000P;
Eppendorf Mastercycler ep realplex, realplex 2 s;
Qiagen Corbett Rotor-Gene Q, Rotor-Gene 3000, Rotor-Gene 6000;
Thermo Scientific PikoReal Cycler; Cepheid SmartCycler; Illumina Eco qPCR.
運輸與保存方式
冰袋運輸。-20℃保存，有效期1年。本品避免反復凍融。建議分裝保存。
注意事項
1. 實驗過程中請使用RNase free耗材。
2. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并佩戴一次性手套操作。
3. 本產品僅作科研用途！
反應體系
組分 | 體積（μL） | 體積（μL） | 終濃度 | |
2×Hifair® V MP Buffer | 12 | 15 | 1× | |
Hifair® V Enzyme Mix | 1 | 1.5 | - | |
Primer/Probe Mix (10 μM) | 1-4 | 1-4 | 0.4 μM | |
模板 RNA | 1-5 | 1-10 | - | |
RNase Free H2O | To 25 | To 30 | - | |
【注】：使用前務必充分混勻，避免劇烈震蕩產生過多氣泡。
a) 引物濃度：Primer Mix中包含多對引物，通常每條引物終濃度為0.4 μM，也可以根據情況在0.1-1.0 μM間進行調整。
b) 探針濃度：Probe Mix中包含多條不同熒光信號的探針，每條探針的濃度可根據具體情況在50-300 nM間調整。
c) 模板稀釋：qPCR靈敏度*，建議將模板進行稀釋使用，控制Ct值在20-35之間適宜。
d) 反應體系：推薦使用25 μL、30 μL或50 μL，以保證目的基因擴增的有效性和重復性。
e) 體系配制：請于超凈工作臺內配制，并使用無核酸酶殘留的槍頭、反應管；推薦使用帶濾芯的槍頭。避免交叉污染和氣溶膠污染。
標準擴增程序
反應階段 | 溫度 | 時間 | 循環數 | |
1 | 逆轉錄 | 50℃a | 10 min | 1 |
2 | 預變性 | 95℃ | 5 min | 1 |
3 | 擴增反應 | 95℃ | 15 sec | 45 |
60℃b | 30 secc |
【注】
a) 逆轉錄：42℃或者50℃均可，時間10-15 min。
b) 擴增反應：擴增反應溫度根據設計的引物Tm值進行調整。CDC*推薦的ORF1ab和N引物，退火溫度建議≥60℃。
c) 熒光信號采集：不同的qPCR檢測儀器所需的熒光信號采集時間不同，請根據最短時間限制進行設置。
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假病毒 | pseudovirus（假病毒） | 11900ES |
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HB200219
