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過氧化氫

時間:2019/11/19閱讀:1752
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信帆生物銷售過氧化氫!

信帆生物專業提供過氧化氫,產品質量穩定,*,確保銷售給客戶的產品是能夠符合質量標準,適合客戶要求的產品。本產品*,歡迎新老客戶前來咨詢訂購.

測定意義:

H2O2是生物體內常見的活性氧分子,主要由SODXOD等催化產生,由CATPOD等催化降解。H2O2不僅是重要的活性氧之一,也是活性氧相互轉化的樞紐。一方面,H2O2可以直接或間接地氧化細胞內核酸,蛋白質等生物大分子,并使細胞膜遭受損害,從而加速細胞的衰老和解體;另一方面H2O2也是許多氧化應急反應中的關鍵調節因子,。

測定原理:

H2O2與硫酸鈦生成黃色的過氧化鈦復合物,在415nm有特征吸收。

需自備的儀器和用品:

可見分光光度計/酶標儀、臺式離心機、可調式移液器、微量石英比色皿/96孔板、丙酮60mL、濃鹽酸10mL、研缽和冰

試劑的組成和配制:

試劑一:丙酮100mL×1瓶,4保存;(自備)

試劑二:粉劑×1瓶,4保存;臨用前加入3mL濃鹽酸充分溶解備用。用不完的試劑4保存

試劑三:液體×1瓶,4保存;

試劑四:液體×1瓶,4保存;

H2O2提取:

1、細菌或細胞樣品的制備:收集細菌或細胞到離心管內,離心后棄上清;按照每500萬細菌或細胞加入1mL試劑一,超聲波破碎細菌或細胞(功率20%,超聲3s,間隔10s,重復30次)8000g 4離心10min,取上清,置冰上待測。

2. 組織樣品的制備:稱取約0.1g組織,加入1mL試劑一進行冰浴勻漿;8000g 4離心10min,取上清,置冰上待測。

3、血清(漿)樣品:直接檢測。

注意事項:

1由于試劑一易揮發,試劑一必須先預冷再加,研磨時必須在冰上研磨

2本試劑盒中試劑的揮發性較高,請帶一次性手套和口罩。

測定步驟

  1. 分光光度計或酶標儀預熱30min以上,調節波長至415nm,蒸餾水調零。
  2. 將試劑二、三和四37℃(哺乳動物)或25℃(其它物種)水浴10min以上。
  3. EP管中按順序加入下列試劑

試劑名稱uL

測定

對照

樣本

250

 

試劑一

 

250

試劑二

25

25

試劑三

50

50

4000g,常溫離心10min,棄上清,留沉淀

試劑四

250

250

加入試劑四溶解沉淀后,室溫靜置5min,取200μL轉移至微量石英比色皿或96孔板中測定415nm處吸光值。對照管只要做一次即可。計算ΔAA測定-A對照。

信帆生物科技有限公司是一家集生物技術咨詢、實驗室耗材、科研試劑的銷售、推廣和售后服務為一體的高科技生物企業,為各大科研機構、高校、技術生物企業提供相關產品。公司憑借良好的產品質量和營銷團隊的奮力開拓,市場空間逐步擴大,營銷網絡覆蓋全國,為客戶供應服務,、用心的服務贏得了眾多企業的信賴和好評,在生物設備領域迅速崛起。
 

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