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產(chǎn)品簡介
核酸外切酶III能作用于雙鏈DNA，沿3’→5’方向逐步切去單核苷酸。與底物的每次結(jié)合，只切除Z末的幾個(gè)核苷酸，從而對雙鏈DNA產(chǎn)生漸進(jìn)缺失。Z適底物是平末端或3’凹陷末端DNA，亦可作用于雙鏈DNA的切割產(chǎn)生單鏈gap，對于對單鏈DNA無活性。3’突出末端抗該酶的切割，拮抗程度隨3’突出末端的長度而改變，四堿基或更長的突出*不能被切割。
詳細(xì)介紹
核酸外切酶III說明
核酸外切酶III能作用于雙鏈DNA，沿3’→5’方向逐步切去單核苷酸。與底物的每次結(jié)合，只切除zui末的幾個(gè)核苷酸，從而對雙鏈DNA產(chǎn)生漸進(jìn)缺失。zui適底物是平末端或3’凹陷末端DNA，亦可作用于雙鏈DNA的切刻產(chǎn)生單鏈gap，對于對單鏈DNA無活性。3’突出末端抗該酶的切割，拮抗程度隨3’突出末端的長度而改變，四堿基或更長的突出*不能被切割。這種特性對于一端是抗性位點(diǎn)（3’突出端）一端是敏感位點(diǎn)（平端或5’突出端）的線性DNA分子，可以產(chǎn)生單向缺失。例如，可將雙鏈DNA用產(chǎn)生不同末端的限制性內(nèi)切酶雙酶切后，利用Exonuclease III的3′→5′的外切酶活性，從一端降解，得到互補(bǔ)的單鏈DNA和5′-P單核苷酸。與BAL 31 Nuclease相比，本酶的堿基特異性較小，如在富含GC的位置上，由于反應(yīng)停止的機(jī)率較低，可用于DNA的Deletion制作。
本是把exonuclease III基因( E. coli)在大腸桿菌中進(jìn)行表達(dá)后，經(jīng)多次純化分離而得到的。
· 質(zhì)量保證
本經(jīng)多次柱純化，SDS-PAGE膠檢測僅可見清晰單一的目的條帶；PCR方法檢測無大腸桿菌DNA殘留，無核酸內(nèi)、外切酶污染。
· 使用建議
不能切割硫代磷酸的橋連。因此，也可以通過引入一個(gè)硫代磷酸核苷酸將DNA分子的一端位點(diǎn)保護(hù)起來，再創(chuàng)建單向缺失。
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