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動物源性食品中四環素類殘留檢測

時間:2015/1/27閱讀:1772
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動物源性食品中四環素類殘留檢測

方法一:依據GBT21317-2007

1. 前處理(以牛肉為例)
     取已經勻漿好的牛肉5g(到0.01g),置于50ml離心管中,加入50ul,10ppm的混標,保證每kg肉中含1mg標樣。
    分別加入20ml、20ml、10ml 0.1mol/L EDTA-Mallvaine緩沖液冰水浴中超聲10min后取出,3000r/min下離心5min,合并上清液,定容至50ml,離心,取上清液,混勻,待凈化。
Mallvaine緩沖液配制:將500ml 0.1mol/L 檸檬酸溶液與312.5 ml 0.2mol/L 磷酸氫二納溶液混合,NaOH溶液調節pH值至4.0+/- 0.05
    0.1mol/L EDTA-Mallvaine緩沖液配制:稱取30.25g乙二胺四乙酸二鈉放入812.5 ml Mallvaine緩沖液中,使其溶解,混勻。
 
固相萃取小柱:
InertSep Pharma (3ml/60mg或6ml/500mg)WondaSep HLB 3ml/60mg均可
 
SPE方法:
活化/平衡:5ml甲醇、5ml水
上樣:50ml待測液中準確取10ml過柱
清洗:5ml水、5ml甲醇:水=1:19
小柱脫水干燥
洗脫:10ml甲醇:乙酸乙酯=1:9
將洗脫液氮吹至干,用流動相定容至1ml,過濾,待測。
2. 色譜分析
色譜柱:InertSustain C18 5um 4.6*250mm
流動相:乙腈:甲醇:0.01%草酸溶液=2:1:7
流速:1.0ml/min
柱溫:25℃
進樣量:60 ul
檢測波長:350nm
儀器:Shimadzu LC-20A
3. 實驗結果
基質加標濃度為 1mg/kg,3次平行實驗結果如下:

名稱

空白加標

基質加標

回收率

回收率RSD

回收率

回收率RSD

土霉素

98.63%

7.5%

85.19%

2.2%

四環素

100.96%

8.4%

95.73%

5.8%

金霉素

91.05%

6.6%

98.11%

8.1%

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