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人胸腎表達趨化因子(BRAK/CXCL14)ELISA試劑盒
本試劑僅供研究使用
試驗原理:
BRAK/CXCL14試劑盒是固相夾心法酶聯免疫吸附實驗(ELISA).已知BRAK/CXCL14濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內進行檢測。先將BRAK/CXCL14和生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經過溫育和洗滌,去除未結合的酶結合物,然后加入底物A、B,和酶結合物同時作用。產生顏色。顏色的深淺和樣品中BRAK/CXCL14的活性濃度呈比例關系。
人胸腎表達趨化因子(BRAK/CXCL14)ELISA試劑盒試劑盒內容及其配制
試劑盒成份(2-8℃保存) | 96孔配置 | 48孔配置 | 配制 |
96/48份酶標板 | 1塊板(96T) | 半塊板(48T) | 即用型 |
塑料膜板蓋 | 1塊 | 半塊 | 即用型 |
標準品:400ng/ml | 1瓶(0.6ml) | 1瓶(0.3ml) | 按說明書進行稀稀 |
空白對照 | 1瓶(1.0ml) | 1瓶(0.5ml) | 即用型 |
標準品稀釋緩沖液 | 1瓶(5ml) | 1瓶(2.5ml) | 即用型 |
生物素標記的BRAK/CXCL14抗體 | 1瓶(6ml) | 1瓶(3.0ml) | 即用型 |
親和鏈酶素-HRP | 1瓶(10ml) | 1瓶(5.0ml) | 即用型 |
洗滌緩沖液 | 1瓶(20ml) | 1瓶(10ml) | 按說明書進行稀釋 |
底物A | 1瓶(6.0ml) | 1瓶(3.0ml) | 即用型 |
底物B | 1瓶(6.0ml) | 1瓶(3.0ml) | 即用型 |
終止液 | 1瓶(6.0ml) | 1瓶(3.0ml) | 即用型 |
自備材料
1. 蒸餾水。
2. 加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。
3. 振蕩器及磁力攪拌器等。
安全性
1. 避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。
2. 實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
3. 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。
人胸腎表達趨化因子(BRAK/CXCL14)ELISA試劑盒操作注意事項
1. 試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
2. 實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
3. 不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。
4. 使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。
5. 使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
6. 洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
7. 底物A應揮發,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
8. 加入試劑的順序應*,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
9. 按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
樣品收集、處理及保存方法
1、 血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2、 血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3、 細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4、 保存------如果樣品不立即使用,應將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
人胸腎表達趨化因子(BRAK/CXCL14)ELISA試劑盒試劑的準備
1. 標準品:標準品的系列稀釋應在實驗時準備,不能儲存。稀釋前將標準品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進行:
400ng/ml | (6號標準品) | 原倍濃度不用稀釋直接加入50ul。 |
200ng/ml | (5號標準品) | 100ul的原倍標準品加入100ul的標準品稀釋液 |
100ng/ml | (4號標準品) | 100ul的5號標準品加入100ul的標準品稀釋液 |
50ng/ml | (3號標準品) | 100ul的4號標準品加入100ul的標準品稀釋液 |
25ng/ml | (2號標準品) | 100ul的3號標準品加入100ul的標準品稀釋液 |
12.5ng/ml | (1號標準品) | 100ul的2號標準品加入100ul的標準品稀釋液 |
0ng/ml | (空白對照) | 原始濃度不用稀釋直接加入50ul。 |
2. 洗滌緩沖液(50×)的稀釋:蒸餾水50倍稀釋。
操作步驟
1. 使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產生加樣上的誤差。
2. 根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據自己的數量來定,能使用復孔的盡量做復孔。
3. 加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。
4. 甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次。
5. 每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。
6. 甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次。
7. 每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。
8. 取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應立即測定結果。
9. 在450nm波長處測定各孔的OD值。
性能
1. 靈敏度:zui小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關系數R值為0.990。
2. 特異性:不與人其它細胞因子反應。
3. 重復性:板內、板間變異系數均小于10%。
4.局限性:6號標準品以上的結果為非線性的,根據此標準曲線無法得到精確的結果。
結果 判 斷 與 分 析
1、儀器值:于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值
2、以吸光度OD值為縱坐標(Y),相應的BRAK/CXCL14標準品濃度為橫坐標(X),做得相應的曲線,樣品的BRAK/CXCL14含量可根據其OD值由標準曲線換算出相應的濃度。
3、檢測值范圍:0-400ng/ml
xy-E10671 【中文名稱】:人腎上腺髓質素(ADM)ELISA試劑盒 【英文名稱】:Human adrenomedullin (ADM) ELISA kit 【靈敏度】:9.375pg/mL
xy-E10672 【中文名稱】:人免疫反應性生長激素(irGH)ELISA試劑盒 【英文名稱】:Immunoreactive Human growth hormone (irGH) ELISA Kit 【靈敏度】:9.375pg/mL
xy-E10673 【中文名稱】:人硫酸褪黑色素(MS)ELISA試劑盒 【英文名稱】:Human melatonin sulfate (MS) ELISA kit 【靈敏度】:9.375pg/mL
xy-E10674 【中文名稱】:人長效甲狀腺刺激素(LATS)ELISA試劑盒 【英文名稱】:One long-acting thyroid stimulating hormone (LATS) ELISA kit 【靈敏度】:9.375pg/mL
xy-E10675 【中文名稱】:人抗利尿激素/血管加壓素/精氨酸加壓素(ADH/VP/AVP)ELISA試劑盒 【英文名稱】:Human antidiuretic hormone / vasopressin / arginine vasopressin (ADH / VP / AVP) ELISA kit 【靈敏度】:9.375pg/mL
xy-E10676 【中文名稱】:人甘丙肽/甘丙素(GAL)ELISA試劑盒 【英文名稱】:Human galanin / galanin (GAL) ELISA kit 【靈敏度】:9.375pg/mL
xy-E10677 【中文名稱】:人促胰液素/分泌素受體(SR)ELISA試劑盒 【英文名稱】:Human secretin / secretagogue receptor (SR) ELISA kit 【靈敏度】:9.375pg/mL
xy-E10678 【中文名稱】:人雌激素受體(ER)ELISA試劑盒 【英文名稱】:Human estrogen receptor (ER) ELISA Kit 【靈敏度】:9.375pg/mL
xy-E10679 【中文名稱】:人超敏生長激素(U S-GH)ELISA試劑盒 【英文名稱】:Human growth hormone hypersensitivity (U S-GH) ELISA kit 【靈敏度】:9.375pg/mL
xy-E10680 【中文名稱】:人超敏前列腺特異性抗原(PSA-U S)ELISA試劑盒 【英文名稱】:People hypersensitive prostate specific antigen (PSA-U S) ELISA kit 【靈敏度】:9.375pg/mL
xy-E10681 【中文名稱】:人苯丙酸諾龍/苯丙酸去甲睪酮(NP)ELISA試劑盒 【英文名稱】:People Nandrolone / acrylic acid nortestosterone (NP) ELISA kit 【靈敏度】:9.375pg/mL
xy-E10682 【中文名稱】:人16α羥基雌酮1(16-α OHE-1)ELISA試劑盒 【英文名稱】:16α hydroxy Human estrone 1 (16-α OHE-1) ELISA Kit 【靈敏度】:9.375pg/mL
xy-E10683 【中文名稱】:人(HYD)ELISA試劑盒 【英文名稱】:Human hydrocortisone (HYD) ELISA Kit 【靈敏度】:9.375pg/mL
xy-E10684 【中文名稱】:人糖皮質激素受體β(GR-β)ELISA試劑盒 【英文名稱】:Human glucocorticoid receptor β (GR-β) ELISA Kit 【靈敏度】:9.375pg/mL
xy-E10685 【中文名稱】:人糖皮質激素受體α(GR-α)ELISA試劑盒 【英文名稱】:Human glucocorticoid receptor α (GR-α) ELISA kit 【靈敏度】:9.375pg/mL
xy-E10686 【中文名稱】:人高敏三碘甲狀腺原氨酸(u-T3)ELISA試劑盒 【英文名稱】:Gao Min three people triiodothyronine (u-T3) ELISA kit 【靈敏度】:9.375pg/mL
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