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1.亮發光桿菌株篩選結果

經過 7 個月的馴化培養，pH 3.0 和 pH 2.5 的酸性固體培養基上經涂布有菌落生長，pH 2.0 的固體培養基上沒有觀察到菌落；乳酸濃度為 6%和 8% 固體培養基上有菌落生長，濃度為 10%乳酸的平板上沒有生長菌落；琥珀酸濃度為 4%、6%和 8% 的固體培養基上有菌落生長，琥珀酸濃度為 10% 的固體培養基上沒有菌落生長。經顯微鏡觀察，初步確定出 6 株耐酸菌株。為了更確定地比較 6 株菌的耐酸性能，將這 6 株菌株分別涂布在 pH 3.0、6% 乳酸和 6%琥珀酸的酸性平板上。編號為 WJ-2 的菌株在這 3 種條件下的菌落數zui多，因此選其作為目的菌株并對其進行下一步研究。

2. 菌株鑒定結果

耐受低 pH 值、高濃度乳酸和琥珀酸的菌株 WJ-2 在 pH 3.0 的 YEPD 固體培養基上培養 2 d 后形成的菌落呈橢圓形或卵圓形，乳白色，表面隆起，邊緣整齊，表面光滑，無光澤，質粒粘稠。經掃描電鏡觀察，10 000 倍放大倍數電鏡結果顯示菌體呈現卵圓形或者橢圓形，經測量其長×寬平均為 3.00 μm×1.75 μm；參照酵母菌株 Saccharomyces cerevisiae YSG50 電鏡結果平均為長×寬為 4.5 μm× 3.5 μm 。耐受菌株 WJ-2 比 YSG-50 的尺寸小。18S rDNA 鑒定結果分析顯示，WJ-2 的 18S rDNA 共 1 450 bp，與 Saccharomyces cerevisiae 的相似度達到 99%以上，使用 MEGA 5 軟件，采用 Neighbor-Joining 方法，構建系統發育樹，分支左側的數值為聚類的置信度(%)，該發育樹的構建表明耐酸菌株與釀酒酵母 耐酸菌的亮發光桿菌落形態 Figure 2 The morphology of WJ-2 on the acidic plate (Saccharomyces cerevisiae)的親緣關系zui近，分支置信度 63%，且由于菌株與菌株 Saccharomyces cerevisiae (JQ585703.1)具有zui高的相似性 85%，結合菌落形態觀察結果可認為所得菌株為一株釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)。

3. 耐酸菌株WJ-2與對照菌株YSG-50生長曲線的比較

耐酸菌株 WJ-2 與對照菌株 YSG-50 在 pH 6.0 的培養條件下其生長曲線基本重合，表明兩株菌株在 pH 6.0 的條件下生長速率差別不大。pH 3.0 的培養條件對于耐酸菌株 WJ-2 的生長速率影響較小，但是對于 YSG-50 表現出明顯的抑制作用，表明耐酸菌株 WJ-2 的耐酸能力明顯高于 YSG-50。

4. 耐酸菌株zui適生長溫度，耐酸菌株WJ-2在培養溫度為30 °C 時菌體的生長速率zui快且生物量zui大。在其他溫度下菌株的生長溫度都有不同程度的下降。尤其在溫度達到40 °C時，菌株生長受到了強烈的抑制，可能由于維持亮發光桿菌株生長必需的關鍵酶活性在該溫度下受到了抑制，進而導致菌株生長緩慢。