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青海發(fā)光桿菌單染色技術(shù)

閱讀:1374      發(fā)布時(shí)間:2018-7-19
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簡單青海發(fā)光桿菌染色通常只用一種染色劑,使細(xì)菌整個(gè)細(xì)胞染上顏色。但看不清結(jié)構(gòu)。所以只便于檢查細(xì)菌的形態(tài)、大小和排列方式等。
【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹?br />1、掌握單染色的操作技術(shù)
2、觀察細(xì)菌的基本形態(tài)
【實(shí)驗(yàn)原理】
單染色即用單純的種染料進(jìn)行染色,多數(shù)采用美藍(lán)、結(jié)晶紫或石碳酸復(fù)紅等堿性染料。此法僅能顯示細(xì)胞的外部形態(tài),而不能辨別其內(nèi)部結(jié)構(gòu)。染色前必須將細(xì)胞固定,其目的是殺死細(xì)菌,并使它粘附在載玻片上。此外,還可以增加菌體對染料的親和力。常用的有加熱和化學(xué)固定兩種方法。無論用哪種方法都應(yīng)盡量使細(xì)菌維持原有的形態(tài),防止細(xì)胞膨脹或收縮。
【實(shí)驗(yàn)材料、藥品及器具】
1、菌種 大腸桿菌(Escherichia coli)
枯草芽孢桿菌(Bacillus Subtilis)
2、染色液 石炭酸品紅染色或結(jié)晶紫染色液(Stining Solutions)
3、無菌水
4、洗瓶裝蒸餾水
5、洗凈的載玻片(Slicle)5片
6、顯微鏡、香柏油、接種環(huán)、酒精燈、擦鏡紙、吸水紙、二甲苯
【實(shí)驗(yàn)步驟】
1、涂片:取一片干凈無油載玻片,在其中央滴一滴無菌水,然后用接種環(huán)以無菌操作方法取少許培養(yǎng)好的大腸桿菌,放在載玻片的水滴中涂勻,注意菌量不宜過多,否則,不易看清單個(gè)菌體。
2、固定:將涂好的玻片在空氣中風(fēng)干或火焰上通過3~4 次,使水份蒸發(fā),此時(shí)細(xì)菌菌體緊貼在玻片上。
3、染色:用石炭酸品紅或結(jié)晶紫染色劑30~60S,然后用洗瓶輕輕沖洗染色劑(注意不要直接沖洗染色部位),直至無多余的染液,晾干或用吸水紙從旁吸干或用微火烘干。
4、用同樣方法將枯草芽孢桿菌制作一張涂片。
5、鏡檢:首先在低倍鏡下找到物像,然后在涂膜中央滴一滴香柏油,換成油浸鏡觀察兩個(gè)菌種的形態(tài)和排列。
6、去除油鏡上的香柏油:先用干凈的擦鏡紙擦2-3 次,再換另一張擦鏡紙蘸取少許二甲苯以除去殘留的香柏油,zui后用擦鏡紙擦干。擦鏡頭時(shí)應(yīng)順著鏡頭直徑方向擦,不要沿著圓周方向擦。
青海發(fā)光桿菌實(shí)驗(yàn)結(jié)果】
1、繪制觀察到大腸桿菌和枯草芽孢桿菌的形態(tài)圖,并注明放大倍數(shù)。
2、用文字描述兩菌株的細(xì)胞形態(tài)。

丙烯菊酯 標(biāo)準(zhǔn)品  CAS號:584-79-2 100MG

草毒死標(biāo)準(zhǔn)品  CAS號: 93-71-0 100MG

枯殺達(dá) 標(biāo)準(zhǔn)品  CAS號:55635-13-7 250MG

烯丙孕素 標(biāo)準(zhǔn)品  CAS號:850-52-2 100MG

莠滅凈 標(biāo)準(zhǔn)品  CAS號:834-12-8 250MG

艾維激素 標(biāo)準(zhǔn)品  CAS號:55720-26-8 5mg

雙甲脒 標(biāo)準(zhǔn)品  CAS號:33089-61-1 250MG
青海發(fā)光桿菌

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