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菌種的保藏一般選用哪種辦法?

閱讀:1749          發布時間:2020-11-5

菌種的保藏一般選用哪種辦法?液氮罐廠家表示液氮超低溫保藏法是現在保存微生物菌種*牢靠的辦法,多數*級菌種保藏單位都采用此法。

1、準備安培管 用于液氮保藏的安培管,要求能耐受溫度忽然改變而不致決裂,因而,需求采用硼硅酸鹽玻璃制造的安培管。安培管的大小通常使用75×10mm的安培瓶。

2、加保護劑與滅菌 保存細菌、酵母菌或霉菌孢子等容易渙散的細胞時,則將空安培管塞上棉塞,在壓力0.11MPa,溫度121℃條件下滅菌15min;若保存霉菌菌絲體則需在安培管內預先參加保護劑,如10%的甘油蒸餾水溶液或10%二甲亞砜蒸餾水溶液,參加量以能浸沒今后參加的菌種塊為限,而后再進行高壓滅菌。


3、接入菌種 將菌種用10%的甘油蒸餾水溶液制成菌懸液,裝入已滅菌的安培管;霉菌菌絲體則可用滅菌打孔器,從平板內切取菌落圓塊,放入含有保護劑的安培管內,然后用火焰熔封。浸入水中檢查有無縫隙。

4、凍住 再將已封口的安培管以每分鐘下降1℃的慢速凍住至-30℃。若細胞急劇冷凍,則在細胞內會構成冰的結晶,因而下降存活率。

5、保藏 經凍住至-30℃ 的安培管當即放入液氮冷凍保藏器的小圓筒內,然后再將小圓筒放入液氮保藏器內。液氮保藏器內的氣相為-150℃,液態氮為-196℃。

6、恢復培養 保藏的菌種需求用時,將安培管取出,當即放入38~40℃的水浴中進行急劇凍結,直到全部融化為止。再打開安培管,將內容物移到適宜的培養基上培養。

綜上所述,此法除了適宜于一般微生物的保藏外,對于一些用冷凍干燥法都難以保藏的微生物如支原體、衣原體、氫細菌、難以構成孢子的霉菌、噬菌體及動物細胞都可長時間保藏,并且不易發作變異。缺點是需求特別設備,以上內容僅供了解,如有問題請與咱們取得聯系以便及時調整。

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