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技術文章

OD600細胞濃度儀檢測原理

閱讀:7862          發布時間:2021-1-22

OD600 DiluPhotometer™分光光度計是一款小巧,易于操控的儀器,專門用于測量接近600 nm波長處的樣品。它適用于包括大腸桿菌和酵母等多種細胞的生長速度的測量。OD600 DiluPhotometer™分光光度計搭配使用Implen’s DiluCell™ 10或DiluCell™ 20自動稀釋比色皿方便測量樣品量少的樣品(各自僅需200 µl 和100 µl的樣品量)。 DiluCell™ 10和DiluCell™ 20兩個型號的比色皿可分別對樣品進行10倍和20倍稀釋。在帶寬為40 nm的OD600上也可用Bradford法(595 nm)定量分析蛋白質。OD600 DiluPhotometer™分光光度計的小巧性和便攜性使其便于在培養箱和厭氧條件下使用。

OD600 DiluPhotometer™經設計用于在波長600 nm附近進行分光光度分析,測定細菌和酵母生長率和蛋白質定量(例如Bradford法)。該儀器采用電池供電操作,可以方便地搬到培養室中,也可在厭氧條件下使用。充滿電后電池可使用1個月。通過600nm LED光源與光纖結合,可進行光密度測量。如有液體灑出,可以很容易地從表面擦掉,可以用甲醛、環氧乙烷對樣品槽區清洗消毒.

朗伯比爾定律

朗伯-比爾定律,也稱為比爾定律,將光吸收與樣品的屬性關聯在一起。這一定律表明,光通過特定樣品時(T =I/ IO,I=透射光,IO =入射光),特定化合物的摩爾消光系數(ε)、材料中吸附物種的濃度(c)和光傳播距離(d)之間存在對數關系 。當保持所有條件不變而只改變光程(光傳播距離)時,可以通過比爾定律自動變化樣品稀釋度。OD600 DiluPhotometer™和DiluCell™結合使用,使得這一原則得以實現。 

自動樣品稀釋
以前必須使用體積至少為1ml的標準比色皿,而且需要額外手動操作稀釋樣品。采用Implen的DiluCell™時,所需樣品量較低,且可以自動稀釋樣品。DiluCell™比色皿的*設計使光程從標準的10 mm降到0.5 mm(DC 20)或1.0 mm(DC 10)。根據朗伯-比爾定律,光程縮短可以將樣品自動稀釋20倍(DC 20)或10倍(DC 10)。DiluCell™自動稀釋可以節省時間,并排除了稀釋誤差和交叉污染。

Bradford法蛋白質定量
Bradford法是一種快速而的總蛋白質濃度測定方法,通過將未知蛋白與考馬斯亮藍G-250染料結合來定量測定樣品的蛋白質濃度。這種方法的定量依據是,在酸性溶液中與蛋白質結合后,考馬斯亮藍G250的大吸收從465nm遷移到595nm。將上述結合與其他不同的、已知濃度的標準蛋白與染料結合進行比較,從而計算未知蛋白的濃度。以牛血清白蛋白(BSA)標準曲線為例。



  

 

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