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[供應]TAKARA 載體克隆試劑盒 pMD 19-T 載體
產品名稱:TAKARA 載體克隆試劑盒 pMD 19-T 載體
產品貨號:6013
產品品牌:takara寶日醫
TAkaRA代理商+紅榮微再
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產品信息:
· 品牌: Takara
· 貨號: 6013
· 規格: 20 反應
pMD 19-T Vector是一種高效克隆PCR產物 (TA Cloning) 的專用載體。本載體由pUC19載體改建而成,在pUC19載體的多克隆位點處的Xba I 和Sal I 識別位點之間插入了EcoR V 識別位點,用EcoR V 進行酶切反應后,再在兩側的3′端添加 “T" 而成。因大部分耐熱性DNA聚合酶進行PCR反應時都有在PCR 產物的3′末端添加一個 “A" 的特性,所以使用本制品可以大大提高PCR產物的連接、克隆效率。
由于本載體以pUC19載體為基礎構建而成,所以它具有同pUC19載體相同的功能。此外,本制品中的高效連接液Solution I 可以在短時間內 (約30分鐘) 完成連接反應,其連接液可以直接用于細菌轉化,大大方便了實驗操作。本制品中的Control Insert (500 bp) 還可以用于Control反應。
本載體與pMD 18-T Vector 相比,本制品的β-半乳糖苷酶的表達活性更高,菌落顯示藍色的時間縮短,菌落顯示的藍色更深。因此,克隆后更容易進行克隆體的藍白篩選。
用途 |
1. 進行TA克隆,克隆PCR產物。 2. 對克隆后的PCR產物使用BcaBEST Sequencing Primers、M13 Primers進行DNA測序。 |
產品名稱:克隆用T載體pMD™19-T Vector Cloning Kit
產品貨號:6013
產品品牌:takara寶日醫
TAkaRA代理商+紅榮微再
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1. Solution I 請于冰中融解。
2. 克隆時使用的Insert DNA片段 (PCR產物) 建議進行切膠回收純化,否則PCR產物中的短片段DNA (甚至是電泳也無法確認的非特異性小片段)、殘存引物等雜質都會影響TA克隆效率。
3. 按照本實驗操作進行連接后,直接進行轉化時的連接液不要超過20 μl。當要轉化的DNA量較大或準備進行電轉化時,需對連接液進行乙醇沉淀,純化DNA后再進行轉化。進行乙醇沉淀時使用Dr. GenTLE Precipitation Carrier (Code No.: 9094) 可以提高DNA的回收率。
4. 連接反應請在25℃以下進行,溫度升高 (>26℃) 較難形成環狀DNA。連接效率偏低時,可適當延長連接反應時間至數小時。
5. 本制品來源于pUC19載體,因此,適合pUC19載體的感受態細胞都可以使用,如:JM109等。
pMD 19-T Vector的結構 |
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2. 克隆時使用的Insert DNA片段 (PCR產物) 建議進行切膠回收純化,否則PCR產物中的短片段DNA (甚至是電泳也無法確認的非特異性小片段)、殘存引物等雜質都會影響TA克隆效率。
3. 按照本實驗操作進行連接后,直接進行轉化時的連接液不要超過20 μl。當要轉化的DNA量較大或準備進行電轉化時,需對連接液進行乙醇沉淀,純化DNA后再進行轉化。進行乙醇沉淀時使用Dr. GenTLE Precipitation Carrier (Code No.: 9094) 可以提高DNA的回收率。
4. 連接反應請在25℃以下進行,溫度升高 (>26℃) 較難形成環狀DNA。連接效率偏低時,可適當延長連接反應時間至數小時。
5. 本制品來源于pUC19載體,因此,適合pUC19載體的感受態細胞都可以使用,如:JM109等。
產品名稱:TAKARA 載體克隆試劑盒 pMD 19-T 載體
產品貨號:6013
產品品牌:takara寶日醫
TAkaRA代理商+紅榮微再
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