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植物組織直接PCR試劑盒檢測原理
產品用途
本試劑盒采用*的裂解緩沖液裂解組織(新鮮、凍存組織)，所得裂解物無需純化即可作為模板，用抗抑制的2×Super direct PCR Taq Mix進行擴增，擴增產物可直接點樣電泳。
產品特點
· 直接以裂解物為模板進行PCR，適用于樣品高通量篩選。
· 擴增片段<2 kb 。
適用范圍
非多糖、多酚植物。
操作步驟
請提前準備95℃的水浴或金屬浴。
A：基因組DNA提取
1、取5 mg或0.5 cm2左右的植物組織樣品，剪碎后加入50µl Buffer P1，吹吸或渦旋混勻。（注意：切勿加入過量葉片組織，以便酶解反應更順利進行）。
2、95℃水浴或金屬浴孵育10分鐘。
3、加入50µl Buffer P2,混勻后直接作為模板進行PCR或置于4℃或-20℃保存。
B：PCR擴增
注意事項
· 樣品避免反復凍融。
· 使用時試劑*化凍、混勻。
· 對于不易裂解組織(如蠟質葉片)，可以延長95℃的孵育時間至30分鐘。
· 如擴增條帶較弱，可適當增加模板用量或PCR循環數(不宜超過40個循環)。
· 如非特異擴增較多，可調整退火溫度或適當增減模板用量。
· 提取物4℃可保存三個月，-20℃可保存六個月（避免反復凍融）。
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