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熒光分光光度計與紫外分光光度計屬一類產品，結構均由激發光源、單色器、樣品室、光電倍 增管和讀出（記錄）裝置所組成。但是它們光源是不同的，熒光分光光度計多采用高壓汞燈、氙燈和激光光源。同時，熒光測量多采用激發光和發射光成直角的光路，儀器組件的布置有所不同。

    (1)激發光源：要比吸收法中光源強度大。
    汞燈：發射強度大、穩定，不需復雜電源，但譜線不連續，數目少，主要用于濾片熒光計。
    碘鎢燈：提供連續光譜300~700mn。
    氙燈：發出射線的強度大，譜線連續，分布于200~700 nm光域內，且在300~400nm 波段內射線強度幾乎相等，但該燈的電源功率要求大，且電源穩定，因此電源結構復雜。
    激光：發光強度大，能極大地提高熒光分析的靈敏度。
    (2)樣品池：通常由石英池（液體樣品用）或固體樣品架（粉末或片狀樣品）組成。測量液體時，光源與檢測器成直角安排；測量固體時，光源與檢測器成銳角安排。低溫熒光測定時在一樣品池外套一個液氮的透明石英真空瓶。
    (3)單色器：熒光分光計通常具有兩個濾光片：濾光片在光源與樣品池之間，濾去不需要的光，讓需要的激發光通過。第二濾光片在樣品池與檢測器之間，濾去溶劑散射 光、容器表面散射光、雜質發出的光等，讓待測物質發射的熒光通過。
    熒光分光光度計通常具有兩個光柵，位置同濾光片，單色性好。
    (4)檢測器：因熒光通常較弱，采用光電倍增管作檢測器，靈敏度高。選擇光電倍增管要考慮：響應波長、靈敏度和嗓聲水平。 藍敏管對蛋白質、核酸的測量適用，而紅敏管則適用于熒光染料檢測。
    (5)顯示系統：光度表、計算機操作系統等。