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18 2018-4

原代細胞融合實驗步驟

實驗方法原理原代細胞融合的誘導物種類很多.常用的主要有滅活的仙臺病毒(Sendaivirus),聚乙二醇(Polyethyleneglycol,PEG)和電脈沖。目前應用zui廣泛的是聚乙二醇,因為它...

16 2018-4

原代細胞培養目的與用途

1、原代細胞科學研究:藥物研究開發與基礎研究藥物研究與開發(1)新藥篩選:如化學合成藥物藥效研究、中藥有效成分篩選與鑒定等。(2)疫苗研究與開發:如病毒性疫苗的研究與開發(肝炎病毒疫苗、艾滋病疫苗等)...

13 2018-4

腫瘤細胞染色體數目異常的原因

腫瘤細胞分裂是指細胞分裂為兩個相同副本的過程。普通人的一生中要經歷無數次的這一過程。為了生成兩個*相同的副本,細胞必須地分離它們的染色體,這一事件依賴于稱之為動粒(kinetochore)的專門結構將...

11 2018-4

原代細胞培養有哪些經驗和教訓

原代細胞嚴格無菌操作,多噴噴酒精,要是對滅菌的東西不放心,自己包自己送自己烘干。不要和別人共用試劑耗材,自己準備一套。有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測。水浴鍋很臟,生化培養箱要是得手動...

9 2018-4

原代細胞的穩定性

除非原代細胞產品說明書上另有特別說明,否則所有PeproTech蛋白產品都為凍干粉形式,在室溫下也能保持很好的穩定性。但是,我們推薦凍干產品保存于-20℃。大多數凍干產品經溶解和稀釋后,可短時間保存于...

4 2018-4

原代細胞凍存是保存的主要方法之一

原代細胞凍存是細胞保存的主要方法之一。利用凍存技術將細胞置于一196~C液氮中低溫保存,可以使細胞暫時脫離生長狀態而將其細胞特性保存起來,這樣在需要的時候再復蘇細胞用于實驗。而且適度地保存一定量的細胞...

2 2018-4

原代細胞的透過性

原代細胞的選擇透過性:這種膜可以讓水分子自由通過,細胞要選擇吸收的離子和小分子(如:氨基酸、葡萄糖)也可以通過,而其它的離子、小分子和大分子(如:信使RNA、蛋白質、核酸、蔗糖)則不能通過。膜蛋白:指...

30 2018-3

細胞系自動化篩選技術

zui常用的細胞系方法是檢測96孔細胞培養板中蛋白的濃度;另外一個方法是讓細胞在軟瓊脂上生長形成集落,然后利用原位免疫沉淀技術獲得高產細胞。近年來,發展起來的高通量自動化篩選技術也被受關注。為實現克隆...

28 2018-3

細胞株修復特定基因

雖然細胞株DNA突變是物種進化的原動力,但突變帶來的損傷也往往是危害極大的。因此,物種自身進化出了保護自己不受基因突變帶來的損傷的修復機制。其中一類機制叫做“DNA錯配損傷修復”,它能夠改變由于基因在...

26 2018-3

腫瘤細胞無法分裂與再生

腫瘤細胞建立起線粒體這一細胞的發電所來增加氧化作用。線粒體大量生成氧自由基損害DNA,zui終造成了細胞周期阻滯。Sadek博士說:“我們發現了以往未知的一個介導心肌細胞周期阻滯的保護機制,其是因氧依...

23 2018-3

如何解決細胞系培養板的密閉和污染問題

細胞系培養板的加樣和操作:細胞培養板在進行細胞操作時同樣遵循嚴格無菌的原則,各項操作要保證規范、科學,不對細胞的生長造成額外的影響。這其中zui常見的問題就是如何保證加樣后細胞的均勻和盡量減少換液對細...

21 2018-3

原代細胞生長的檢查方法

原代細胞是zui簡單的檢測細胞生長的方法。計數細胞一般利用臺盼藍(錐蟲藍染色,臺盼藍(錐蟲藍)不能透過活細胞正常完整的細胞膜,故活細胞不著色。而死亡細胞的細胞膜通透性增高,可使染料進入細胞內而使細胞著...

19 2018-3

原代細胞或可調節血管口徑和通透性

原代細胞在酶的作用下,由它再進一步生成一組旁分泌激素物質,如血栓素和前列腺素等,這類物質對調節血管口徑和通透性有明顯的作用,還能引起炎癥反應和疼痛,并影響血液凝固。中性粒細胞內含許多彌散分布的細小的淺...

12 2018-3

原代細胞活力評估難度低

傳統的原代細胞培養主要是通過顯微鏡下形態學變化以及傳代培養周期的變化預估細胞生長生存狀態。這種主觀判斷既無法量化,也無法進行統計學分析。因此,目前對細胞存活質量的判斷并沒有準確、客觀的統一標準,并且對...

9 2018-3

細胞株為何不貼壁?

總結細胞株不貼壁可能原因如下:●胰蛋白酶消化過度●支原體污染●培養基pH值過堿(NaHCO3分解)●細胞老化●接種細胞起始濃度太低或太高解決方法:●縮短胰蛋白酶消化時間或降低胰蛋白酶濃度●分離培養物,...

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